1樓：匿名使用者
當某波長光通過溶液時，其中的某些粒子會產生吸收，分光光度法通過檢測光強度變化來確定溶液中粒子濃度，不同濃度的粒子吸收的某波長的光是不一樣的。所謂參比溶液，即不含待測粒子的空白對照溶液，待測粒子濃度為0，規定此溶液完全透光；以此為基準，測定其他含待測粒子溶液的濃度。
2樓：魯步慧巧
在進行光度測量時，利用參比溶液來調節儀器的零點，可以消除由於吸收池壁及溶劑對入射光的反射和吸收帶來的誤差，並扣除干擾的影響。參比溶液可根據下列情況來選擇。
a 當試劑及顯色劑均無色時，可用蒸餾水作參比溶液。
b 顯色劑為無色，而被測試液中存在其它有色離子，可用不加顯色劑的被測試液作為參比溶液。
c 顯色劑有顏色，可選擇不加試樣溶液的試劑空白作參比溶液。
d 顯色劑和試液均有顏色，可將一份試液加入適當掩蔽劑，將被測組分掩蔽起來，使之不再與顯色劑作用，而顯色劑及其它試劑均按試液測定方法加入，以此作為參比溶液，這樣就可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾。
e 改變加入試劑的順序，使被測組分不發生顯色反應，可以把此溶液作為參比溶液消除干擾。
分光光度法分析中,為什麼要使用參比溶液
3樓：czz雨辰
用分光光度計測量，被測的都為液體，通常是稀釋後的，要測的是溶質吸光度，而溶劑也是有影響的，所以要有參比
4樓：紫冰雨的季節
一、原理
可見光、紫外線照射某些物質,主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收,而產生化合物的可見紫外吸收光譜.基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法.它是以朗伯——比耳定律為基礎.
朗伯—比耳定律 a = lg—- = eclt
式中 a為吸收度；
t為透光率；
e為吸收係數,採用的表示方法是（e1％1cm）,其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml）,液層厚度為1cm時的吸收度數值；
c為100ml溶液中所含被測物質的重量（按乾燥品或無水物計算）,g；
l為液層厚度,cm.
二、使用範圍
凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用於藥品的鑑別、純度檢查及含量測定.
三、儀器
可見-紫外分光光度計.其應用波長範圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區.主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、資料處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成.
本儀器是根據相對測量的原理工作的,即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標準（空白或稱參比）溶液,並認為它的透光率為100％（或吸收度為0）,而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對於標準溶液而言,實際上就是由出射狹縫射出的單色光,分別通過被測試樣和標準溶液,這兩個光能量之比值,就是在一定波長下對於被測試樣的透光率（或吸收度）.
本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質.
使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作.
四、儀器的校正
1.波長的準確度試驗
以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm範圍內.
可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正.
2.吸收度的準確度試驗
3.雜散光的試驗
4.波長重現性試驗
5.解析度試驗
五、測定方法
1.對照品比較法
（1）按各品種項下的方法,分別配製供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%,所用溶劑也應完全一致,在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後,按下式計算含量,即得.
（2）計算式
a樣×g對/稀釋倍數×100×1
含量（%）= ————————————-- ×100%
a對×g樣/稀釋倍數×100×1
2.吸收係數法
（1）按各品種項下的方法配製供試品溶液,在規定的波長處測定其吸收度,再以該品種在規定條件下的吸收係數計算含量.用本法測定時,應注意儀器的校正和檢定.
（2）計算式
a樣含量（%）= ——————————————- ×100%
g樣/稀釋倍數×(e1％1cm)對×100×1
3.計算分光光度法
採用計算分光光度法應慎重.本法有多種,使用時均應按各品種項下規定的方法進行.當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時,波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響,故對照品和供試品測試條件應儘可能一致.
若測定時不用對照品,如維生素a測定法,則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定.
六、注意事項
1.空白溶液與供試品溶液必須澄清,不得有渾濁.如有渾濁,應預先過濾,並棄去初濾液.
2.測定時,除另有規定外,應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照,採用1cm的石英吸收池.
3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度,以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確,除另有規定外,吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的準確度,並以吸收度最大的波長作為測定波長.
4.一般供試品溶液的吸收度讀數,以在0.3～0.7之間的誤差較小.
5.吸收池應選擇配對,否則要引入測定誤差.在規定波長下兩個吸收池的透光率相差小於0.5％的吸收池作配對,在必要的情況時,須在最終測量扣除吸收池間的誤差修正值.
6.由於吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測定供試品的吸收度後應減去空白讀數,再計算含量.
7.儀器的接地必須良好,一切裸露的零件對地電位不得超過24伏（測電筆的氖管不得發亮）.
8.在使用過程中,如需開啟試樣室蓋時或暫時停止測試時,必須及時推入光門鈕杆（使光電管前光門關閉）,保護光電管,以防止光電管受強光或長時間照射而損壞.
9.在測定時或改測其它檢品時,應用待測溶液沖洗吸收池3～4次,用乾淨綢布或擦鏡紙擦淨吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨損）.
10.取吸收池時,應拿毛玻璃兩面,切忌用手拿捏透光面,以免粘上油汙.使用完後及時用測定溶劑衝淨,再用純化水衝淨,用乾淨綢布或擦鏡紙擦乾,晾乾後,放入吸收池盒中,防塵儲存.
11.若吸收池內外壁沾汙,兩池差較大的處理.
（1）可用綢布纏在扁竹條外或用脫脂棉纏在細玻璃棒上蘸上乙醇,輕輕摩擦,再用純化水衝淨.
（2）如上述方法處理不好,必要時可用重鉻酸鉀-硫酸洗液泡洗1～2分鐘,用自來水衝淨,再用純化水衝淨.
（3）不得用毛刷刷洗或硬物拭擦,以防止表面光潔度受損影響正常使用.
12.請務必注意經常保持矽膠的乾燥,目的是保護光學元件和光電放大器系統不致受潮損壞而影響儀器的正常工作,如發現有的矽膠由藍色變為粉紅色,應立即更換.該儀器乾燥劑筒有兩個：
一個是裝在放大器暗盒上,另一個裝在單色光器暗盒上.
13.在更換矽膠乾燥劑時,應關閉切斷電源.
14.在停止工作期間,主機試樣室內應放入袋裝或筒裝矽膠乾燥劑.用防塵罩罩住整個儀器,並在防塵罩內放數袋防潮矽膠.
15.儀器在操作中,狹縫的寬度應從小逐漸開大.若狹縫過大,由於進入光電管的光能量強度過大,將會使放大器輸出訊號達到飽和,以至數字顯示出溢位（即數字閃爍或示1不變）.
這不是儀器有故障.
16.將波長旋轉放在625nm,鋏縫關閉在0.02nm附近,選擇按鍵恢復在停止工作部位（即三個鍵均彈出）.
17.搬動儀器時應搬在主體端,不要搬在試樣室和光電管盒端以及光源燈室部位,以防止儀器狹縫或光路部件受力而發生變形.並在搬動或運輸時,應將可動部分固定,如各旋鈕可用膠布貼住,狹縫位置開大些,然後固定,不要關小狹縫,以免運輸時振動使狹縫刀口受損壞.
18.儀器的光柵、反射鏡絕對不能擦拭,否則將損壞儀器光學表面,增加雜散光.
19.儀器經過搬動請及時檢查並糾正波長精度,為保證測定的準確性請經常校準波長精度.如有異常,應立即報告質量保證部,但不得擅自調整,並及時做好記錄.
七、結果計算
ae1％1cm（供試品） = ——
cle1％1cm（供試品）
含量（%）= ——————————- ×100%
e1％1cm（標準值或對照品）
八、允許差
儀器分析方法的誤差限度,除另有規定外,其相對偏差應在±(2.0～3.0)%.
5樓：雨天不下雨
參比溶液選擇：a 試液及顯色劑均無色,蒸餾水作參比溶液.b 顯色劑為無色,被測試液中存在其他有色離子,用不加顯色劑的被測試液作參比溶液.
c 顯色劑有顏色,可選擇不加試樣溶液的試劑空白作參比溶液.d 顯色劑和試液均有顏色,可將一份試液加入適當掩蔽劑,將被測組分掩蔽起來,使之不再與顯色劑作用,而顯色劑及其他試劑均按試液測定方法加入,以此作為參比溶液,這樣就可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾.e 改變加入試劑的順序,使被測組分不發生顯色反應,以此溶液作為參比溶液消除干擾.
一般,不加顯色劑的測試溶液,參比溶液為溶解待測物質的溶劑.如,測試溶液為cuso4溶液(0.1%h2so4中),則選擇0.
1%h2so4作為參比溶液;若測試溶液為kmno4水溶液,則以水為參比.
6樓：匿名使用者
抵消介質對特定波長光線的吸收影響，保證測定的準確性。
7樓：休瑤渾鵑
因為：用分光光度計測量,被測的都為液體,通常是稀釋後的,要測的是溶質吸光度,而溶劑也是有影響的,所以要有參比
測定吸光度時，為什麼要選擇參比溶液？選擇參比液的原則是什麼
8樓：笨笨熊**輔導及課件
bai參比溶液又稱空白du溶液,在吸光度測定中用來調zhi節儀dao器的零點,以消
除比色皿、專容器、試屬劑及其他有色物質對於入射光的反射、吸收帶來的誤差。
參比溶液測量時用作比較的、不含被測物質但其基體儘可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應是一條平坦的直線。有時，基體中雖不含被測物質，但含有別的物質，這時必須保證其不影響測試。
經常碰到的是試劑空白中含有被測物質，此時必須經過純化將其除去。否則將影響測定結果。在色譜分析中，有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰，計算機在資料處理中不會計入它們，不影響測定。
9樓：匿名使用者
定吸光度時，為什麼要選擇參比溶液？選擇參比液的原則是什麼定吸光度時，為什麼要選擇參比溶液？選擇參比液的原則是什麼
用分光光度法做試樣定量分析時，應如何選擇參比溶液
用要測離子濃度為定值，其它物質濃度相同的溶液。 如何選擇參比溶液 a.如果僅有顯色劑與被測組分反應的產物有吸收，則可以用純溶劑作參比溶液 b.如果顯色劑和其他試劑有顏色，則用試劑溶液作參比液 c.如果顯色劑與試劑中干擾組分反應，其反應產物有吸收，則按如下方式配置參比液 1 吸收較弱時，直接用試劑溶液...
凱氏定氮法與分光光度法的優缺點，常用來測定蛋白質含量的方法有哪些？優缺點是什麼？
假面 凱氏定氮法的優點 可用於所有食品的蛋白質分析中 操作相對比較簡單 實驗費用較低 結果準確，是一種測定蛋白質的經典方法 用改進方法 微量凱氏定氮法 可測定樣品中微量的蛋白質。缺點 最終測定的是總有機氮，而不只是蛋白質氮 實驗時間太長 至少需要2h才能完成 精度差，精度低於雙縮脲法 所用試劑有腐蝕...
可見分光光度法測鐵含量為什麼加入試劑的量 順序和時間要一致
墨汁諾 可見分光光度法測定都要有反應，反應的和程度和溶液反應的時間有一定關係，測定中為了讓各測量結果具有好的一致性，減少誤差，通常要求試劑的量 順序和時間要一致。順序不能顛倒。還原劑是為了把fe3 還原為fe2 緩衝溶液是調節一定的ph值範圍，使配位反z應更完全，所以要在顯色劑之前加。還原劑必須先加...