1樓：匿名使用者
噻唑藍（mtt）比色法操作注意事項
噻唑藍（mtt）：四唑鹽
原理：mtt比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法.活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶幹水的藍紫色產物，並沉澱在細胞中，而死細胞沒有這種功能。
二甲亞碸（dmso）能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與活細胞數成正比。
優點：簡單快速、靈敏、經濟
缺點：由於mtt經還原所產生的甲瓚產物不溶於水，需被溶解後才能檢測。這不僅使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產生影響，而且溶解甲的有機溶劑對實驗者也有損害。
應用：新藥篩選、細胞毒牲試驗、腫瘤放射敏感性實驗等
mtt主要有兩個用途
1）藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養的細胞毒性的測定；
2） 細胞增殖及細胞活性測定。
比色法操作注意事項
1） 選擇適當的細胞接種濃度，保證細胞培養結束時濃度不至於過滿。
2） 種板技術：均勻。
3） 實驗時應設定調零孔，溶媒孔，加藥孔。
調零孔：培養基、mtt、dmso。（無細胞）
溶媒孔：培養液、mtt、dmso、細胞、溶酶。
加藥孔：培養液、mtt、dmso、細胞、不同濃度的藥物。
（一般5-7個梯度，設3-5個復孔）
4）避免血清干擾：一般選小於10%胎牛血清的培養液進行。
5）邊緣效應：周邊孔加入pbs。
6）mtt的配置： mtt 0.5克，溶於100 ml的磷酸緩衝液。4℃下避光儲存2周。
7）孔板的重複利用（1.做完mtt後用大水流盡量將板衝淨，然後用洗衣粉水泡幾個小時（小心最好讓洗衣粉先化開）。2.用自來水衝淨洗衣粉水，倒扣晾
幹.3.重鉻酸鉀加濃硫酸配成的酸液中浸泡過夜泡洗液（六小時以上即可）後自來水洗淨（20次左右）每個孔都要處理4.用去離子水沖洗3遍，雙蒸水沖洗3
遍，烤乾5.超淨臺中紫外線照射2個小時左右，就可以用了，不可以高壓。或泡酸過夜，dd水沖洗乾淨，烘乾或者晾乾後紫外照射30min以上即可使用。
8）mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細胞絕對數。
9）在用酶標儀檢測結果的時候，為了保證實驗結果的線性，mtt 吸光度最好在0-0.7 範圍內。
10）mtt有致癌性，用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套。
11）配成的mtt需要無菌，mtt對菌很敏感；往96孔板加時不避光也沒有關係，畢竟時間較短，或者你不放心的時候可以操作檯上的照明燈關掉。
2樓：李家四邵
1選擇合適的熔樣方法，製備合適的試樣溶液
(1)氫氧化鈉為熔劑，鹽酸分解；
(2)碳酸鈉燒結，鹽酸分解或碳酸鈉燒結，氯化銨重量法測定純sio。時的濾液，以及純sio。殘渣經焦硫酸鉀熔融後分解溶液，二者合併；
(3)碳酸鈉一硼砂為混合熔劑，稀硝酸和稀硫酸溶解後之濾液，或者稀硝酸溶解液，或濃鹽酸分解。
2顯色反應
(1)掩蔽劑與顯色劑應有正確的配製和儲存方法，否則影響吸光度。
(2)顯色溫度與時間。顯色反應有一定的溫度和時間要求，如高碘酸鉀氧化比色法分析mno，應微沸10～15min使顯色完全，並冷卻至室溫下比色。二安替比林甲烷比色法分析tio。
，由於顯色反應較慢，顯色時間則需較長時間(40min以上)。
(3)比色。比色儀器分光光度計應定期檢定，應選擇正確的波長，合適光程的比色皿。色皿應保持乾淨，受汙染的比色皿可用稀硝酸浸洗，用鏡頭紙擦拭表面，比色皿內液體不能有氣泡或懸浮物。
通常情況下，比色測定在室溫進行。
3樓：提問與問題
比色法在無機材料分析中的應用及注意事項:
1比色法的應用比色法是利用溶液顏色的深淺來確定待測物質含量的一種方法.在無機材料低含量成分分析中,與常用的滴定法、重量法比較,比色法具有較高的準確度和靈敏度.例如,tio2滴定法,存在操作麻煩、終點顏色難以辨認的缺點.
礬土、普通礦渣、鐵礦石中的tio2、mno,粘土、水泥中的tio2,石灰石中的sio2、al2o3、fe2o3,矽砂中的fe2o3等等,這些成份含量低,一般在5%以下,若採用滴定法分析,0.05ml的滴定量就造成較大的誤差,甚至未能檢測出結果.特別是矽質玻璃原料矽砂中的fe2o3,微量fe2o3直接影響其產品質量的評級,因此不能採用滴定法,而應採用比色法進行分析(見jc/t753-2001矽質玻璃原料化學分析方法).
比色法是無機材料化學成分分析的常用方法之一,tio2、mno、al2o3、fe2o3、sio2等低含量成份,採用比色法可獲得較高的準確度,從而能更好地指導生產.
比色測定的操作要點是什麼?方法的基本原理是什麼?
4樓：韓光輝
許多化學物質的溶液具有顏色（無色的化合物也可以加顯色劑經反應生成有色物質），當有色溶液的溶度改變時，顏色的深淺也隨之改變，濃度愈大，顏色愈深。因此，可以用比較溶液顏色深淺的方法來測定有色溶液的濃度。這種方法叫做比色分析法。
一、 朗伯—比爾定律 當一束單色光通過有色溶液時，入射光線的一部分被器皿反射回來，一部分被溶液吸收，另一部分則透過溶液，如圖所示。它們之間有以下關係： io=ia+ir+it （1-1） 式中：
io—入射光強度 ia—吸收光強度 ir—反射光強度 it—透過光強度 由於在實際測定時，所用的比色皿都是同質料用規格的。反射光的強度為一定值，不會引起測量誤差，所以反射光的影響可以不加考慮。則上式可簡化為：
io=ia+it （1-2） 從式1-2可知：當入射光強度io為一定時，被吸收光強度ia愈大，則透過光強度it愈小。也就是說：
光強度的減弱僅與有色溶液對光線的吸收有關。 那麼，溶液對光線的吸收與哪些因素有關呢？實驗證明：
溶液的濃度c愈大，液層厚度l愈厚（即光線在溶液中所經過的路程愈長），則溶液對光線吸收的愈多。它們之間的關係有下式決定： lg = kcl （1-3） 這個公式就是朗伯—比爾（lambert---beer）定律。
公式中的k稱為吸光係數，它表示有色溶液在單位濃度和單位厚度時的吸光度。在入射光的波長、溶液種類和溫度一定的條件下，k為定值。吸光係數是有色化合物的重要特性之一，在比色分析中有著重要的意義。
k值愈大，表示該物質對光的吸收能力愈強，濃度改變時引起吸光度的改變愈顯著，因此比色測定時靈敏度愈高。 朗伯-比爾定律即有色溶液對一定強度光的吸收程度，與液層厚度和溶液中有色物質濃度的乘積成正比。其中朗伯定律說明吸收光與厚度間的關係；比爾定律說明吸收光與濃度間的關係。
朗伯—比爾定律在光電比色計中的應用 假定有兩種有色溶液，其中一種是已知濃度的標準溶液，另一種是待測溶液。根據公式： 在標準溶液中：
as=kscsls （1-4） 在待測溶液中：ax=kxcxlx （1-5） 將式1-4除以式1-5可得： = 1-6 如果上述兩種溶液的液層厚度相等、溫度相同而且是同一種物質的兩種不同濃度的溶液，測定時所選用的單色光的波長亦相同，則有：
ls=lx、ks=kx ，代入式1-6可得： = 1-7 由此可見，在上述條件下，吸光度與濃度成正比。這一關係式就是光電比色計的設計依據，也是比色分析的基本計算公式之一。
式中標準溶液的濃度cs為已知，as和ax可用光電比色計測量出來，則待測溶液的濃度cx即可求出： cx = × cs 1-8 由於在實際測定時，標準溶液和待測溶液都要加以稀釋，而且在報告結果時，多以100毫升（或1000毫升）中的含量來表示。因此，在實際計算時，就需要在上式中乘上稀釋因數。
求待測溶液濃度的方法有：直接比較法（計演算法）、因數法和標準曲線法三種。這些方法在“生物化學及生物化學檢驗技術”課程中有介紹。
波長的選擇： 由於有色溶液對光的吸收具有選擇性，因此進行比色測定時，濾光片必須加以選擇，否則靈敏度很低，導致測量結果不準確。選擇濾光的一般原則是：
濾光片最大透過的光線應該是溶液最大吸收的光線。從顏色上看，濾光片的顏色與待測溶液的顏色應為“互補色”。 什麼叫做互補色呢？
凡是兩種顏色相加後能得到白色，則此兩種顏色就稱為“互補色”，圖中直接相對的兩種顏色，均為互補色。 為什麼選擇濾光片時，要使濾光片的顏色與待測溶液的顏色為互補色呢？這是因為濾光片和有色溶液具有相似的透光特性，與它們本身顏色相同的色光，能夠最大限度地透過。
而與它們本身顏色成互補的色光都能被最大地吸收。
希望能夠幫助你，汙水淨化團隊竭誠為你服務!
比色測定的基本原理是什麼？操作步驟有哪些
5樓：哊點壞
來原理：
比色分析
源是基於溶液對光的選擇性bai吸收而建立du起來的一種分析方zhi法，又稱吸光亮度法。
dao有色物質溶液的顏色與其濃度有關，溶液的濃度越大，顏色越深，利用光學比較溶液顏色的深度，可以測定溶液的濃度。
根據吸收光的波長範圍不同以及所使用的儀器精密程度，可分為光電比色法和分光亮度法等。
步驟1. 用相同型號的比色管。
2. 配製等體積的系列標準樣品。
3. 配製待測樣品(與標準樣品等體積)。
4. 對比，找出相同的濃度。
6樓：匿名使用者
比色測定的基本原copy理bai，操作步驟：
原理：比色分析du
是基於溶液對zhi
光的選擇性吸收而建立起dao來的一種分析方法，又稱吸光亮度法。
步驟：1. 用相同型號的比色管。
2. 配製等體積的系列標準樣品。
3. 配製待測樣品(與標準樣品等體積)。
4. 對比，找出相同的濃度。
比色：比色法(colorimetry)是通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵。
2023年，**人也用五倍子的酒精溶液測定礦泉水中的鐵。但是，比色法作為一種定量分析的方法，大約開始於19世紀30~40年代。
咖啡色的對比色是什麼顏色
咖啡色的對比色是深藍色。對比色通常是指由人的視覺感官所產生的一種生理現象，也就是視網膜對色彩的平衡作用。一般來說，兩種可以明顯區分的色彩，叫對比色。其包括色相對比 明度對比 飽和度對比 色彩和消色的對比等。擴充套件資料 對比色的定義為 在色相環中每乙個顏色對面的顏色，稱為互補色，也是對比最強的色組。...
買房有什麼注意事項，買房注意事項是什麼？
買房子要注意 一 看樓時候需要注意的地方。1 看電器看插座。有的開發商偷工減料，連電線和插座也放過。購買住房前要仔細檢查，否則將來會很麻煩。2 看建材看格局。要被漂亮的建材迷惑，房屋優勢是否有效發揮，有賴於格局設計得是否周全。3 看地面看牆角。看牆角是否平整，有沒有裂縫，有沒有滲水，如果剛貼上的新牆...
靜電噴漆的安全及操作注意事項
樂百氏 1 電氣 靜電噴漆區內不應設定與噴漆無關的電氣裝置。在進行靜電噴漆作業時，嚴禁在靜電噴漆區內使用攜帶式燈具和其他移動式用電裝置。2 通風 在靜電噴漆時，應保持送 排風狀態。送 排風未開啟時，噴塗裝置不應工作。噴漆工作結束後，送 排風應持續進行5 10min後再關閉。3 接地 3.1噴漆間內所...