1樓:匿名使用者
deae-纖維素為二乙氨乙基纖維素,是陰離子交換劑。
其原理基於離子交換層析:離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。
由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的ph條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。
反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的ph值洗脫下來。
2樓:網友
你用的是什麼離子交換柱,強酸型陽離子交換柱,還是弱酸型陽離子交換柱,還是強鹼性陰離子交換柱,還是弱鹼性陰離子交換柱,以及你的蔗糖酶的等電點,和你緩衝液的等電點,有這些性質我才能準確的告訴你原因。
3樓:真小樣
它是在以離子交換劑為固定相, 離子交換層析是常用的層析方法之一。它是在以離子交換劑為固定相, 液體為流動相的系統中進行的。離子交換劑與水溶液中離子或離子化合物的 液體為流動相的系統中進行的。
反應主要以離子交換方式進行,
能否用其他沉澱法分離蔗糖酶
4樓:小張先生家的大可愛
能用其他沉澱法分離頌消備蔗糖酶。
蔗糖酶又稱「轉化酶」。糖苷酶之橋雹一,蔗糖酶(invertase)(βd-呋喃果糖苷水解酶)(fructofuranoside fructohydrolase)(特異地催化非還原糖中的β-d-呋喃果糖苷鍵水野毀解,具有相對專一性。不僅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,也能催化棉子糖水解,生成密二糖和果糖。
糖化酶的分離純化 是根據蛋白質什麼性質設計的
5樓:墨_亦寒
蛋白質的分離純化方法根據蛋白質不同的生理特性有不同的方。
法分類,主要根據以下幾個性質來設計純化方法:
1)溶解性:蛋白質分子的直徑很大,達到了膠體微粒的大小,所以,蛋白質溶液具有膠體的性質。 (2)水蛋白質在蛋白酶作用下,經水解反應,生成氨基酸。
3)鹽析:少量的鹽(如硫酸銨、硫酸鈉等)能促進蛋白質的溶解,但如向蛋白質溶液中加入濃的鹽溶液,可使蛋白質的溶解度降低而從溶液中析出。這種作用叫做鹽析。
這樣析出的蛋白質在繼續加水時,仍能溶解,並不影響原來蛋白質的性質。 (4)變性:蛋白質受熱、紫外線、x射線、強酸、強鹼、重金屬(如鉛、銅、汞等)鹽、一些有機物(甲醛、酒精、苯甲酸)等的作用會凝結,這種凝結是不可逆的,即凝結後不能在水中重新溶解,這種變化叫做變性。
5)顏色反應:蛋白質可以跟許多試劑發生顏色反應。例如,有些蛋白質跟濃硝酸作用時呈黃色。
6)蛋白質的灼燒:蛋白質被灼燒時,產生具有燒焦羽毛的氣味。
酶的分離提純要依次經過過濾、層析、沉澱、提純等步驟 請問這句話錯在**?
6樓:小磊作業又沒交
其實錯在步驟不配套,既然層析了就不需要沉澱了。
層析是指利用混合物中各組分物理化學性質的差異(如吸附力、分子形狀及大小、分子親和力、分配係數等),使各組分在兩相(一相為固定的,稱為固定相;另一相流過固定相,稱為流動相)中的分佈程度不同,從而使各組分以不同的速度移動而達到分離的目的。
其實酶分離提純的一般是經過層析後,就沒必要沉澱了,直接提純了。
在蛋白質純化中,除了離子交換層析之外,還有哪些常用的柱層析方法純化蛋白質
7樓:匿名使用者
在蛋白質純化中,除了離子交換層析之外,還有哪些常用的柱層析方法純化蛋白質。
離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的。由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的ph,所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的ph.
當ph較低時,負電基團被中和,而正電基團就很多; 在ph較高時,蛋白質的電性與低ph時相反。當蛋白質所處的ph,使蛋白質的正負電荷相等,此時的ph稱為等電點。離子交換層析所用的交換劑是經酯化、氧化等化學反應引入陽性或陰性離子基團製成的,可與帶相反電荷的蛋白質進行交換吸附。
帶有陽離子基團的交換劑可置換吸附帶負電荷的物質,稱為陰離子交換劑,如deae-纖維素樹脂;反之稱為陽離子交換劑,如cm-纖維素樹脂。不同的蛋白質有不同的等電點,在一定的條件下解離後所帶的電荷種類和電荷量都不同,因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當緩衝液中的離子基團與結合在離子交換劑上的蛋白質相競爭時,親和力小的蛋白質分子首先被解吸附而洗脫,而親和力大的蛋白質則後被解吸附和洗脫。
因此,可通過增加緩衝液的離子強度和/或改變酸鹼度,便可改變蛋白質的吸附狀況,使不同親和力的蛋白質得以分離。
下列關於酶工程的敘述,正確的是( )a.酶的分離提純要依次經過過濾、層析、沉澱、提純等步驟b.尿糖
8樓:夏夜灬夢魘
a、酶的分離提純要依次經過選材、破碎細胞、抽提、純化、製劑等步驟,故a錯誤;
b、尿糖試紙中含有葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶,故b錯誤;
c、酶的固定主要是為了讓酶在催化過程中尤其是液相反應催化過程中以固相形式參與而採用的一種方法方法,並不是酶的分離純化的方法,故c錯誤;
d、酶的固定化技術是指將酶固定在不溶於水的承載物上,或者使酶交聯在一起,故d正確.
故選d.
下列關於酶工程的敘述,正確的是( )a.酶的分離提純要依次經過過濾、層析、沉澱、提純等步驟b.尿糖
9樓:手機使用者
a、層析是利用各組分物理性質的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法.層析後不需要沉澱,a錯誤;
b、尿糖試紙中含有葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶,b錯誤;
c、加酶洗衣粉能提高去汙能力是利用酶的催化作用,c錯誤;
d、利用枯草桿菌生成的-澱粉酶可用於降解水體中的某些汙染物,d正確.故選:d.
蛋白質水解產物陽離子交換柱層析時的洗脫順序
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