離子交換層析的原理是什麼 已解決

時間 2021-09-10 01:17:09

1樓:泰匯園林

離子交換層析法是從複雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸鹼性,極性,所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和ph值,物質就能依次從層析柱中分離出來。

層析開始前,功能基團與反離子穩定結合,就與反離子發生可逆交換,與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團,鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密,易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同,洗脫下來的時間不同,因此得以分開。

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離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性,以及在不同ph值環境中,此物質所帶的電荷和電性強弱,陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷,這些鹼性蛋白質,它們在酸性溶液中較穩定,親和力強,故採用陽離子交換劑。

在鹼性溶液中較穩定,則使用陰離子交換劑,如果欲分離的物質是兩性離子,一般考慮在它穩定的ph範圍帶有何種電荷,作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與儲存離子交換劑可在柱上再生,若有脂溶性物質則可用非離子型去汙劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌。

2樓:炎兒丶

離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的。由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的ph,所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的ph。

當ph較低時,負電基團被中和,而正電基團就很多; 在ph較高時,蛋白質的電性與低ph時相反。當蛋白質所處的ph,使蛋白質的正負電荷相等,此時的ph稱為等電點。離子交換層析所用的交換劑是經酯化、氧化等化學反應引入陽性或陰性離子基團製成的,可與帶相反電荷的蛋白質進行交換吸附。

帶有陽離子基團的交換劑可置換吸附帶負電荷的物質,稱為陰離子交換劑,如deae-纖維素樹脂;反之稱為陽離子交換劑,如cm-纖維素樹脂。不同的蛋白質有不同的等電點,在一定的條件下解離後所帶的電荷種類和電荷量都不同,因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當緩衝液中的離子基團與結合在離子交換劑上的蛋白質相競爭時,親和力小的蛋白質分子首先被解吸附而洗脫,而親和力大的蛋白質則後被解吸附和洗脫。

因此,可通過增加緩衝液的離子強度和/或改變酸鹼度,便可改變蛋白質的吸附狀況,使不同親和力的蛋白質得以分離。

離子交換樹脂的主要應用是什麼,離子交換樹脂的用途是什麼呢? 5

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