1樓：漫閱科技
醫院裡對手術器械通常採用間歇滅菌法，即把器械煮沸30分鐘，在20—37℃的恆溫環境中放置一天，這樣，某些沒有殺死的微生物芽孢會誤以為危險期已過，”放心大膽”地進行繁殖，這時再蒸煮殺菌，連續反覆幾次，手術器械便可以達到完全沒有微生物的要求。高壓蒸汽和乾熱空氣兩種方法都可以用於滅菌，不過由於多數微生物的耐乾熱性較強，所以高壓蒸汽滅菌一般僅需在121℃溫度、30分鐘的條件下即可達目的，而乾熱空氣滅菌的條件則為140℃、4小時。除此之外，太陽光中的紅外線可以使微生物細胞中的水分大量蒸發，紫外線又能使微生物細胞中的核酸分子發生變化，所以常晒衣服和被褥是一種廉價的滅菌方法。
消毒，是不徹底的滅菌方法。因為在許多場合下不需要把微生物全部殺死，只要消毒就可以了。例如手上碰破了一塊皮，可以擦些紫藥水或紅藥水；打針的時候，大夫先用碘酒、後用酒精給**消毒，這些都是為了達到區域性滅菌的目的。
在使用消毒藥水時，千萬不要把紅藥水和碘酒同時擦到**上，以免引起中毒。巴斯德經過多次實驗確認：把鮮牛奶加熱到71℃，持續15分鐘，即可以消滅其中的結核桿菌和傷寒桿菌，又不致於損壞牛奶的營養價值和風味。
在這之後，人們普遍地使用這種方法儲存牛奶。這就是有名的巴氏消毒法。
2樓：厙溫橋淑
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要是用於接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌，火焰滅菌通常用於無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、矽氟塑料塞等反覆通過火焰數次，利用火焰對管口等進行滅菌，阻止管口汙染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。
1.2幹烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌。
一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後，均可在烤箱內乾熱滅菌。通常加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌。但不宜超過170℃，玻璃量具易變形。
降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂。乾熱滅菌時裝入幹烤箱內的物品切勿緊密，應有空隙，利於熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底。
2.溼熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，穿透力強，溫度高，滅菌效果最好。
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。
有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規定的溫度，必須將冷空氣完全排除。否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規定的要求，滅菌就不徹底。
3.紫外線
殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制。
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與溼度等因素有關。
我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低於70μw/cm2。一般紫外燈使用超過100h，則應更換。表面有塵土，降低滅菌效果。
紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對溼度40%~60%為宜。
3樓：植山雁經晉
熱滅菌法
熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性，酶活性消失，致使細胞死亡。通常有乾熱、溼熱和間歇加熱滅菌等法。
乾熱滅菌
直接利用火焰將微生物燒死（如燒接種環、載玻片和試管口等）。不能用火焰滅菌的物品則利用熱空氣滅菌,將物品放在烘箱中加熱到160～170℃,持續90分鐘，此法適用於玻璃、金屬和木質的器皿。
溼熱滅菌
以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。巴氏滅菌法就是溼熱滅菌，此法有兩種方式，①低溫長時間處理：在61.
7～62.8℃下處理30分鐘；②高溫短時間處理：在71.
6℃或略高溫度下處理15分鐘。在上述諸法中，以蒸氣加壓滅菌效果最好，可用常壓蒸氣滅菌，也可在高壓蒸氣鍋中（一般使用1千克/釐米2）滅菌,其蒸氣溫度可達121℃,能將耐熱的芽孢在30分鐘內全部殺死。但對某些易被高壓破壞的物質，如某些糖或有機含氮化合物，宜在0.
6千克/釐米2壓力下(110℃)滅菌15～30分鐘。
間歇滅菌
間歇滅菌連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐
100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌
1小時。滅菌溫度不超過100℃,不致造成糖類等物質的破壞，而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死，從而達到徹底滅菌的目的。
輻射滅菌
輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法。較常用的有紫外線，其他還有電離輻射（射線加快中子等）。波長在25000～80000奈米之間的鐳射也有強烈的殺菌能力,以波長26500奈米最有效。
輻射滅菌法僅限於某一定材料，因所需裝置複雜，難於廣泛使用。
滲透壓滅菌
滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離，不能進行正常的新陳代謝，結果導致微生物的死亡。
化學試劑滅菌
大多數化學藥劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5％石炭酸、70％乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性，以便清除滅菌後材料上殘餘的藥物。
常用的滅菌方法有哪些？
4樓：中國農業出版社
（1）加熱
滅菌法利用高溫來殺死微生物（超過最高生長溫度）的方法。加熱滅菌的原理：當高溫作用於微生物時，首先引起細胞內生理生化反應速率加快，機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等，隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協調，停止了生長髮育。
隨著高溫的繼續作用，細胞內原生質便發生凝固，酶結構完全破壞，活動消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動消失，細胞死亡。加熱滅菌可分乾熱滅菌和溼熱滅菌兩大類。
1）乾熱滅菌 利用灼燒或乾熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為乾熱滅菌法。由於乾熱滅菌使用方便，方法簡單，故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法：
直接利用火焰把微生物燒死，故又稱焚燒滅菌法。採用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用於金屬製的接種工具、試管口及汙染物品等的處理。熱空氣滅菌法：
即在電熱恆溫乾燥箱中利用乾熱空氣來滅菌。
2）溼熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。溼熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。
①高壓蒸汽滅菌 由於高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時間，提高工作效率，加之蛋白質在溼熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經20～30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時，可將壓力增加到0.152兆帕，延長至1～2小時。
在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。
圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋
在使用高壓滅菌鍋時，要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。如果空氣不排除乾淨，則鍋內溫度將低於同樣壓力下由純飽和蒸汽產生的溫度，影響滅菌效果。
此法適用於各種耐熱物品的滅菌，如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。所採用的蒸汽壓力與時間，應根據待滅菌物品的性質、體積與容器型別等決定。
②常壓蒸汽滅菌 這是採用自然壓力、100℃蒸汽進行滅菌的方法。它裝置簡單、成本低，當前使用最廣泛。只要砌一個爐灶，買1～2只大鍋，上面用磚和水泥砌成，也可用大鐵桶、木桶等，體積大小可自行決定，但不宜過大，以裝800～1500瓶為好。
設計常壓灶時應注意的問題：大小根據生產規模來定，灶頂部最好製成拱圓形，這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會打溼棉塞；灶倉內要有層架結構，以便分層裝入滅菌物；灶上應安裝溫度計，可隨時觀察灶內溫度的變化；因滅菌時間長，鍋內水不夠蒸發，故容量大的灶要安裝加水裝置；灶倉的密閉程度要儘可能高，這樣既提高滅菌效果，又節省燃料。菇農在生產中還常用一種小型蒸汽發生裝置，引出蒸汽後直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進行常壓滅菌。
這種方法不用建灶，簡便省工（圖2-7）。常壓滅菌一般水燒開後保持8～10小時，悶一夜即可。
圖2-7 簡易常壓滅菌法
③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反覆幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內，100℃處理1小時左右，殺死微生物的營養細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時芽胞會萌發，再以同樣方法加熱處理，反覆3次，可達到滅菌目的。該方法可用於不耐高溫的藥品、營養物、特殊培養基的滅菌。
④低溫巴氏滅菌法 即在60～70℃下，經一定時間，殺死有害微生物的方法。適應於不耐高溫的物品消毒。有些培養基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營養體，又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。
食用菌生產中培養料堆積發酵工藝，就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。
（2）過濾除菌法
又分液體過濾和空氣過濾兩種，就是採用機械的方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器，通過機械過濾，只讓液體培養基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。這種方法適用於對熱不穩定的體積小的液體培養基（如動物血清、蛋白質、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超淨工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣，從風洞中吹出，來造成工作臺範圍的無菌狀態。
過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用矽藻土製的、石棉製的、陶瓷土製的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜製成的。
（3）輻射滅菌法
利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線、β-射線、γ-射線、x-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射，紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。
1）紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應，將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制dna的複製而發生變性、致死。另一方面，空氣在紫外線照射下產生的臭氧（o3），也具有一定的殺菌作用。
紫外線的有效作用距離為1.2～2.0米。
紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方，個數依房間大小而定，容1～2個人操作的接種室，安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內，然後開啟紫外燈照射。如果接種室體積較大，開燈照射2小時才能達到滅菌效果；如果較小，只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。
由於紫外線穿透力弱，即使是普通玻璃也不能濾過，因此，只適於空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體**，尤其是眼睛有殺傷作用，應避免直視，工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下，能提高殺菌效果。
細菌接受致死量紫外線照射後，隨即給予可見光照射，部分細菌有復活的可能。幹細胞比溼細胞對紫外線的抗性強，孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。
2）微波滅菌 由於微生物的細胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波電場中被極化，並隨著電場方向的改變而轉動，在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能，這種熱能不同於外部加熱，可在短時間裡使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加，從而達到滅菌效果。用ym7601型微波爐只需60秒鐘就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。
3）臭氧發生器消毒 臭氧（o3）具有強烈的氧化作用，能破壞微生物的細胞膜與核酸。o3也是一種暫態物質，常溫下能自然分解，還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。
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