1樓：風翎火山
我也遇到了這個問題，蛋白濃度有點低，透析了還看不出來，一濃縮就有了，很難受！您這個問題解決了嗎？可以分享一下嗎？
2樓：匿名使用者
透析袋檢漏：透析袋一端用夾子夾緊（或用繩子紮緊），灌滿水後，用手指適當加壓，檢查不漏，方可裝入樣品。樣品裝袋：
先用緩衝液溶解蛋白質，然後裝在透析袋裡，透析袋不要裝滿，通常要留三分之一至一半的空間，因為透析時會有水分子進去，如果裝得太滿的話透析袋可能會脹破，將袋子剩餘空間的空氣排出去後，加樣端用夾子夾緊。透析：將溶解蛋白質緩衝液作為透析液加入乙個大燒杯中，裡面放入乙個攪拌子，把裝有樣品的透析袋放進透析液中，使透析袋處於懸浮狀態，把裝置放到磁力攪拌器上使攪拌子緩緩轉動，注意不要讓攪拌子打到透析袋上，即可進行透析。
為了保證蛋白活性，最好放到冰箱的冷藏室中透析，為加快透析速度，要多次更換透析液外，還需注意透析袋內液體的量。可用氯化鋇溶液檢驗透析液，如果有沉澱說明還有硫酸根存在，還需繼續透析。
蛋白質在透析的過程中為什麼會出現沉澱
3樓：消費者協會一隊
出現絮狀沉澱是很正常的現象，因為透析本身就是乙個復性的過程，那麼出現回
絮狀的沉澱就是一些不能夠答覆性成為天然結構的一些目的蛋白和一些雜蛋白，而這些都是我們所不需要的。所以說出現絮狀沉澱是正常的也是我們希望看到的。
至於出現沉澱的原因不外乎條件變化太劇烈了，建議不要讓透析的條件變化太劇烈了，主要是ph的濃度的變化和樣品中一些其他東西如尿素的濃度變化。
如果樓主透析樣品中出現太多的沉澱，甚至於跑膠中基本沒有帶了，那麼建議樓主換一種透析液來用，如用tge也就是傳說中的萬金油來試試，我一直用的是這種透析液，效果很不錯。tge配法如下：
50mm tris
0.5mm edta
50mm nacl
5%或10％甘油
如果有條件加入1％的甘氨酸或精氨酸和穀胱甘肽會更好些。
細胞提取蛋白時加入裂解液時為什麼會有透明膠狀沉澱
4樓：就偶是個
你好，很高興回答你的問題，
有可能是細胞核內dna的釋放造成的，
可以適當的減少裂解液的用量，
或者加入dna酶，
希望能採納
為什麼提取質粒時加入異丙醇出現了白色絮狀沉澱？ 5
5樓：傾城妃子活寶
異丙醇與蛋白質反應，使其沉澱。
1、採用強鹼液、加熱或溶菌酶（主要針對革蘭氏陽性細菌）可以破壞菌體細胞壁，十二烷基磺酸鈉（sds）和tritonx-100（一般很少使用）可使細胞膜裂解。經溶菌酶和sds或triton x-100處理後，細菌染色體dna會纏繞附著在細胞碎片上，同時由於細菌染色體dna比質粒大得多，易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。
2、當用強熱或酸、鹼處理時，細菌的線性染色體dna變性，而共價閉合環狀dna的兩條鏈不會相互分開，當外界條件恢復正常時，線狀染色體dn**段難以復性，而是與變性的蛋白質和細胞碎片纏繞在一起，而質粒dna雙鏈又恢復原狀，重新形成天然的超螺旋分子，並以溶解狀態存在於液相中。在細菌細胞內，共價閉環質粒以超螺旋形式存在。
3、異丙醇為無色透明液體，有似乙醇和丙酮混合物的氣味，能與醇、醚、氯仿和水混溶，能溶解生物鹼、橡膠、蟲膠、松香、合成樹脂等多種有機物和某些無機物，與水形成共沸物，不溶於鹽溶液。常溫下可引火燃燒，其蒸汽與空氣混合易形成**混合物。
6樓：成都癲癇匯康
異丙醇與蛋白質反應，使其沉澱。分析如下。
採用強鹼液、加熱或溶菌酶（主要針對革蘭氏陽性細菌）可以破壞菌體細胞壁，十二烷基磺酸鈉（sds）和tritonx-100（一般很少使用）可使細胞膜裂解。經溶菌酶和sds或triton x-100處理後，細菌染色體dna會纏繞附著在細胞碎片上，同時由於細菌染色體dna比質粒大得多，易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。當用強熱或酸、鹼處理時，細菌的線性染色體dna變性，而共價閉合環狀dna(covalently closed circulardna，簡稱cccdna）的兩條鏈不會相互分開，當外界條件恢復正常時，線狀染色體dn**段難以復性，而是與變性的蛋白質和細胞碎片纏繞在一起，而質粒dna雙鏈又恢復原狀，重新形成天然的超螺旋分子，並以溶解狀態存在於液相中。
在細菌細胞內，共價閉環質粒以超螺旋形式存在。
7樓：匿名使用者
首先要知道，質粒是 共價，閉合，環狀的dna（cccdna）。以常用的鹼裂解法為例：當菌體在naoh和sds溶液中裂解時，蛋白質與dna發生變性，當加入中和液後，
8樓：匿名使用者
異丙醇能使蛋白質變性，出現的絮狀沉澱應為蛋白質
9樓：一縷清風
首先：你要知道是從什麼菌種裡面提取質粒包括菌種一般常識，其次：是用什麼方法提取質粒包括原理，
再次：知道為什麼要加入異丙醇，起的作用是什麼？
最後：才可能知道白色絮狀沉澱是什麼。
加異丙醇是用來沉澱質粒的，出現白色絮狀沉澱，說明質粒提取純度不夠，也就是有蛋白質等汙染，蛋白質等雜質和質粒一起沉澱了，能看到，說明汙染已經特別嚴重了，
呵呵 ，可以用酚氯仿或者酒精沉澱再除雜一次，也可能是你得方法不好，
或者換個方法試試，
也可能是你操作的問題 比如 樣品用量大 超過了該方法的提取極限 等
分析清楚後 再做 祝你好運
我把CAD圖匯入廣聯達後提取的梁裡面怎麼沒有配筋啊，還有提取梁標註時候為什麼會把鋼筋符號丟下呢，謝謝
標註可以用工具選項其他中自己設定要標註的任何構件資訊 提取過後還要進行原位識別，識別成功的樑會變成綠色 廣聯達cad導圖為什麼梁沒有下部通長筋 匯入廣聯達麼 我一直在用廣聯達 首先 你要確定梁下部是有通長筋的 在集中標註裡面可以看到 其次 如果有 你沒識別到 這個時候集中標註中沒有識別出通長筋資訊就...
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