1樓:北京索萊寶科技****
實時螢光定量pcr檢測mrna的表達,然後westernblot檢測蛋白表達量.
首先你確定拿到了這兩種細胞系,通過pcr反應證明乙個是野生型乙個是突變型,即snp。然後用試劑盒提取rna,設計引物,採用半定量或絕對定量的方法,測定mrna表達水平;然後另取細胞裂解,提取總蛋白,用特異性抗體檢測蛋白表達量。
2樓:匿名使用者
蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變,會影響其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如鐮狀細胞貧血,就是由於血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸,從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸,降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度,使它在紅細胞中隨血流至氧分壓低的外周毛細血管時,容易凝聚並沉澱析出,從而造成紅細胞破裂溶血和運氧功能的低下。另實驗證明,若切除了促腎上腺皮質激素或胰島素a鏈n端的部分氨基酸,它們的生物活性也會降低或喪失,可見關鍵部分氨基酸殘基對蛋白質和多肽功能的重要作用。
所謂「分子病」,首先是蛋白質一級結構的改變,從而引起其功能的異常或喪失所造成的疾病。可見蛋白質關鍵部位甚至僅乙個氨基酸殘基的異常,對蛋白質理化性質和生理功能均會有明顯的影響。分子病是基因突變引起的遺傳性疾病,當然首先就是dna分子結構的改變,是其分子編碼相應蛋白質基因結構的改變,這是 2023年美國科學家pauling在研究血紅蛋白時首先提出來的。
目前已知血紅蛋白分子異常有500多種,其中約一半在臨床上可造成分子病。分子病也包括整條多肽鏈在合成時的缺失,如血紅蛋白分子病中的地中海貧血,可缺失血紅蛋白α-亞基或β-亞基等。現在已知人類有幾千種先天遺傳性疾病,其中大多是由於相應蛋白質分子異常或缺失所致。
細胞中蛋白質表達量用什麼方法
3樓:匿名使用者
如做成提取液可用 mgprot/ml 毫克蛋白每毫公升
也可用毫克蛋白每10的6次方個 mgprot / 100萬個
檢測基因蛋白水平的表達有哪些方法
4樓:匿名使用者
怎樣用基因水平或蛋白水平檢測細胞膜上表達的物質
a、不同種類的蛋白質行使不同的功能,細胞中蛋白質的種類越多,通常細胞的功能越複雜,a錯誤.b、細胞膜上有運載物質的載體蛋白、細胞質中有起催化作用的酶、細胞核中的染色體上有與dna結合的有蛋白質,不同種類的蛋白質功能不同,是生命活動的主要承擔者,b正確.c、dna主要存在於細胞核中,rna主要存在於細胞質中,c錯誤.d、人細胞核及細胞質中的遺傳物質都是dna,只有少數病毒體內只含rna的遺傳物質才是rna,d錯誤.故選:b.
細胞內蛋白質的運輸途徑,細胞內蛋白質的分選運輸途徑主要有那些?
奕義永子 在分子生物學之中目前普遍知道的細胞內蛋白質的運輸途徑主要有四種 1 蛋白質的跨膜轉運 主要是指在細胞基質中合成的蛋白質轉運到內質網 線粒體 質體與過氧化物酶等細胞器。這些蛋白質的運輸受到結合於n端的轉運肽的引導和其他空間定位訊號序列參與,蛋白質在進入細胞器時必須在分子伴侶的幫助下解摺疊或維...
蛋白質的跨膜運輸方式有哪些,細胞內蛋白質的跨膜運輸有哪幾類
麴淑英熊風 1,協助擴散與主動運輸的區分標準是不是濃度梯度 協助擴散和主動運輸都屬於載體介導的跨膜運輸方式,它們之間的關鍵區別在於實現跨膜轉運是否需要能量。協助擴散的動力來自於濃度梯度,故不需要能量。而主動運輸因為一般是逆濃度梯度或電化學梯度進行跨膜轉運,所以需要能量,其運輸過程所需能量 有三種 a...
人體,蛋白質,細胞,等是什麼關係
蛋白質是人體中含量最高的有機物 蛋白質有構運輸 調節 免疫 催化 結構等功能 是人體的基因的體現者 一些細胞自身用的蛋白質會在遊離的核糖體合成 供自身用 所以細胞中有蛋白質 幽憂深谷 蛋白質是一切生命的物質基礎,是肌體細胞的重要組成部分,是人體組織更新和修補的主要原料,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質是...