1樓:槐樹的戀愛
現在用的多的就是這幾種,樓主挑著看吧
細菌計數1.計數器測定法:
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.
1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過乙個細胞,當乙個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成乙個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出乙個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。
使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)
這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例單介紹其操作:,簡
(1)取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
(2)在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管
(3)於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.
一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。
2樓:玫瑰續約
測定細菌數量的方法
1、計數器測定法:
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.
1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過乙個細胞,當乙個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成乙個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出乙個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。
使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)
這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例,簡單介紹其操作:
(1).取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
(2).在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管
(3).於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.
一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。
測定微生物生長的方法很多,各種方法均有其優缺點,也不是在任何情況下都適用。在微生物學工作中一般常用的是平皿菌落計數法、計數器法和比濁法。至於哪種方法比較適合你,得根據你的具體條件而定。
單菌落得獲得在於你塗佈時候菌種原液的濃度 無論你怎麼塗,肯定都會有一定的濃度梯度,在稀釋到一定程度的時候,你可以理解為有一定的閾值,這樣只有部分區域可以培養形成菌落。 說到底關鍵在於原液的濃度和培養條件合適,塗佈的方式是次要的,只要均勻的塗開,相當於確保稀釋的效果,就可以培養到單菌落。 不知道你是否滿意。
菌落計數方法 一梯度17個菌,二梯度2個菌,怎麼計算
3樓:
因為在你的檢測結果中所有稀釋度所長出來的細菌都沒有超過30個的,因此應該選擇較低稀釋度的計數平板,並乘以相應的稀釋倍數報告之。也就是說應該選擇「一梯度」進行計算並報告。
細菌總數測定方法可分為什麼法和什麼法
4樓:匿名使用者
現在一般是用平板計數法,以前的標準是用營養瓊脂,新標準時用平板計數瓊脂。還可以用快速測試紙檢驗。前者比較普遍
高中生物牛奶中細菌的分離與計數實驗中怎麼取樣
5樓:樓浩
實驗題目:牛奶中的細菌分離與計數
實驗目的:分離牛奶中的菌,並進行計數回.
實驗材料答:培養皿,接種環,瓊脂1.2%、氯化鈉0.5%、酵母粉0.5% 蛋白腖1% 無菌操作台,酒精燈、酒精棉、生化培養箱
實驗方法:塗佈法
實驗步驟:將牛奶液體稀釋10-4~10-10次方,根據牛奶中菌長得多少而定,也可以多做幾個,進行塗平板.可分離出單菌落,也可計數,根據所要的菌落長出的個數計,在進行相關的計算即可.
實驗結果:記錄資料及現象
下列有關微生物培養的敘述中,不正確的是( )a.獲得純淨培養物的關鍵是防止雜菌汙染b.單菌落的分離
6樓:萌神
a、微生物培養中獲得純淨培養物的關鍵是防止雜菌汙染,a正確;
b、通常可以採用稀釋塗佈平板法或平板劃線法進行單菌落的分離,以消除汙染的雜菌,b正確;
c、培養基通常可以進行高壓蒸汽滅菌,但對於培養基中有高溫易分解的成分,就不能用此方法,如培養基中的碳酸氫鈉等物質,c錯誤;
d、倒平板後需要將培養皿倒置,以防止培養基蒸發冷凝成的水滴入培養基而汙染,d正確.
故選:c.
微生物菌體濃度的測定方法有哪些
7樓:北京索萊寶科技****
活菌計數法
此法能準確地判斷菌液濃度,但有明顯的滯後性,無法在第一時間內2確定其實際濃度,待結果出來後,再開始檢測,菌的活性將有所下降,給實驗室操作帶來諸多不便;
比濁法此法能快速地判斷菌液濃度,但為粗略的估計值,受限於各人肉眼的觀察,誤差較大,準確性不高。
微生物菌體濃度的測定(纖維製品的抗菌性試驗方法為例)
一、菌種:
大腸桿菌(escherichiacoliatcc8099)
二、試劑與儀器
蛋白腖牛肉膏
氯化鈉cary100紫外——可見光分光光度計
三、培養基
營養細菌培養基nb。
蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,蒸餾水1000ml,ph6.8±0.2。
營養瓊脂培養基na。
蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,瓊脂粉15g,蒸餾水1000ml,ph6.8±0.2。
1、對數生長期菌液的製備
取在規定儲存代數之內的供試菌種,在火焰旁,挑取一鉑金環,在營養瓊脂培養基上劃線,於37℃±1℃培養24h後,在平板上挑取飽滿的單菌落,置於20ml營養細菌培養基中,振盪(110r/min,振幅3cm)培養24h。
2、穩定期菌液的製備
取培養好的對數生長期菌液0.4ml,於20ml營養細菌培養基中,再振盪培養4h,即為穩定期菌液。
四、吸光度(abs值)的測定
取培養好的穩定期菌液,按不同的設定稀釋倍數(5、10、20、40倍),依次進行稀釋,(稀釋液為1/20nb),在660nm標準波長下,測得一組不同菌液濃度的吸光度。(用空白1/20nb進行測試前調零)。
五、活菌計數
在無菌室內火焰旁進行操作。分別依次測定四個不同稀釋倍數的菌落數。每個稀釋倍數依次制定幾個濃度梯度,用滅菌吸管各吸取1ml注入平皿。
注入約15ml,45~50℃的營養瓊脂培養基,隨即轉動平皿,使樣品與培養基充分混合均勻,待培養基凝固後,翻轉平皿,置37℃±1℃培養箱內培養24h後,進行菌落計數。用肉眼觀察,點出菌落數,記下各平皿的菌落數後,
求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。
六、標準曲線的製作
運用生物統計org資料分析軟體,以吸光度abs值為橫座標,穩定期的菌液濃度為縱座標繪製標準曲線。
高二生物問題,高二生物問題
我倒是覺的第一種方法有問題,機率怎麼能用除於二算呢?我不知道怎麼開方,但我覺的第二種方法是正確的.問題出在 機率 兩個字上,機率是有個上下限的範圍,你從a,a算aa,aa,aa,求的機率是個最大的機率,而從aa,aa,aa求回去就是求的乙個最小幾率,所以之間有差別,明白了嗎?高二生物問題 5 一些高...
高二生物題
第一題 生物共同具有的生命現象是 a 細胞 b 應激性 c 有性生殖 d 反射應該選b。a.細胞 紅細胞沒有細胞核就不能進行細胞 b.高二上冊課本上,歸納的六個生物的基本特性,就包含了應激性.c.有性生殖 人可以進行有性生殖。許多生物只能進行無性生殖,如營養生殖,孢子生殖等。d.反射 有神經系統才能...
高二生物問題
穩態具有十分重要的生理意義。因為細胞的各種代謝活動都是酶促生化反應,因此,細胞外液中需要有足夠的營養物質 氧和水分,以及適宜的溫度 離子濃度 酸鹼度和滲透壓等。細胞膜兩側一定的離子濃度和分布也是可興奮細胞保持其正常興奮和產生生物電的重要保證。穩態的破壞將影響到細胞功能活動的正常進行,如高熱 低氧 水...