高二生物 分解菌方法,測定細菌數量方法,獲取單菌落方法。越全越好

時間 2021-08-16 04:53:51

1樓:槐樹的戀愛

現在用的多的就是這幾種,樓主挑著看吧

細菌計數1.計數器測定法:

即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.

1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。

本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。

2、電子計數器計數法:

電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過乙個細胞,當乙個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成乙個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。

該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。

3、活細胞計數法

常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出乙個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。

使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。

廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。

4、比濁法

比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。

此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。

5、測定細胞重量法

此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。

此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。

6、測定細胞總氮量或總碳量

氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。

7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)

這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例單介紹其操作:,簡

(1)取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。

(2)在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管

(3)於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.

一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。

2樓:玫瑰續約

測定細菌數量的方法

1、計數器測定法:

即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.

1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。

本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。

2、電子計數器計數法:

電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過乙個細胞,當乙個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成乙個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。

該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。

3、活細胞計數法

常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出乙個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。

使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。

廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。

4、比濁法

比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。

此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。

5、測定細胞重量法

此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。

此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。

6、測定細胞總氮量或總碳量

氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。

7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)

這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例,簡單介紹其操作:

(1).取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。

(2).在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管

(3).於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.

一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。

測定微生物生長的方法很多,各種方法均有其優缺點,也不是在任何情況下都適用。在微生物學工作中一般常用的是平皿菌落計數法、計數器法和比濁法。至於哪種方法比較適合你,得根據你的具體條件而定。

單菌落得獲得在於你塗佈時候菌種原液的濃度 無論你怎麼塗,肯定都會有一定的濃度梯度,在稀釋到一定程度的時候,你可以理解為有一定的閾值,這樣只有部分區域可以培養形成菌落。 說到底關鍵在於原液的濃度和培養條件合適,塗佈的方式是次要的,只要均勻的塗開,相當於確保稀釋的效果,就可以培養到單菌落。 不知道你是否滿意。

菌落計數方法 一梯度17個菌,二梯度2個菌,怎麼計算

3樓:

因為在你的檢測結果中所有稀釋度所長出來的細菌都沒有超過30個的,因此應該選擇較低稀釋度的計數平板,並乘以相應的稀釋倍數報告之。也就是說應該選擇「一梯度」進行計算並報告。

細菌總數測定方法可分為什麼法和什麼法

4樓:匿名使用者

現在一般是用平板計數法,以前的標準是用營養瓊脂,新標準時用平板計數瓊脂。還可以用快速測試紙檢驗。前者比較普遍

高中生物牛奶中細菌的分離與計數實驗中怎麼取樣

5樓:樓浩

實驗題目:牛奶中的細菌分離與計數

實驗目的:分離牛奶中的菌,並進行計數回.

實驗材料答:培養皿,接種環,瓊脂1.2%、氯化鈉0.5%、酵母粉0.5% 蛋白腖1% 無菌操作台,酒精燈、酒精棉、生化培養箱

實驗方法:塗佈法

實驗步驟:將牛奶液體稀釋10-4~10-10次方,根據牛奶中菌長得多少而定,也可以多做幾個,進行塗平板.可分離出單菌落,也可計數,根據所要的菌落長出的個數計,在進行相關的計算即可.

實驗結果:記錄資料及現象

下列有關微生物培養的敘述中,不正確的是(  )a.獲得純淨培養物的關鍵是防止雜菌汙染b.單菌落的分離

6樓:萌神

a、微生物培養中獲得純淨培養物的關鍵是防止雜菌汙染,a正確;

b、通常可以採用稀釋塗佈平板法或平板劃線法進行單菌落的分離,以消除汙染的雜菌,b正確;

c、培養基通常可以進行高壓蒸汽滅菌,但對於培養基中有高溫易分解的成分,就不能用此方法,如培養基中的碳酸氫鈉等物質,c錯誤;

d、倒平板後需要將培養皿倒置,以防止培養基蒸發冷凝成的水滴入培養基而汙染,d正確.

故選:c.

微生物菌體濃度的測定方法有哪些

7樓:北京索萊寶科技****

活菌計數法

此法能準確地判斷菌液濃度,但有明顯的滯後性,無法在第一時間內2確定其實際濃度,待結果出來後,再開始檢測,菌的活性將有所下降,給實驗室操作帶來諸多不便;

比濁法此法能快速地判斷菌液濃度,但為粗略的估計值,受限於各人肉眼的觀察,誤差較大,準確性不高。

微生物菌體濃度的測定(纖維製品的抗菌性試驗方法為例)

一、菌種:

大腸桿菌(escherichiacoliatcc8099)

二、試劑與儀器

蛋白腖牛肉膏

氯化鈉cary100紫外——可見光分光光度計

三、培養基

營養細菌培養基nb。

蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,蒸餾水1000ml,ph6.8±0.2。

營養瓊脂培養基na。

蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,瓊脂粉15g,蒸餾水1000ml,ph6.8±0.2。

1、對數生長期菌液的製備

取在規定儲存代數之內的供試菌種,在火焰旁,挑取一鉑金環,在營養瓊脂培養基上劃線,於37℃±1℃培養24h後,在平板上挑取飽滿的單菌落,置於20ml營養細菌培養基中,振盪(110r/min,振幅3cm)培養24h。

2、穩定期菌液的製備

取培養好的對數生長期菌液0.4ml,於20ml營養細菌培養基中,再振盪培養4h,即為穩定期菌液。

四、吸光度(abs值)的測定

取培養好的穩定期菌液,按不同的設定稀釋倍數(5、10、20、40倍),依次進行稀釋,(稀釋液為1/20nb),在660nm標準波長下,測得一組不同菌液濃度的吸光度。(用空白1/20nb進行測試前調零)。

五、活菌計數

在無菌室內火焰旁進行操作。分別依次測定四個不同稀釋倍數的菌落數。每個稀釋倍數依次制定幾個濃度梯度,用滅菌吸管各吸取1ml注入平皿。

注入約15ml,45~50℃的營養瓊脂培養基,隨即轉動平皿,使樣品與培養基充分混合均勻,待培養基凝固後,翻轉平皿,置37℃±1℃培養箱內培養24h後,進行菌落計數。用肉眼觀察,點出菌落數,記下各平皿的菌落數後,

求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。

六、標準曲線的製作

運用生物統計org資料分析軟體,以吸光度abs值為橫座標,穩定期的菌液濃度為縱座標繪製標準曲線。

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