為什麼聚丙烯醯胺凝膠電泳小分子先出來?不適合凝膠過濾一樣都是分子篩原理嗎?看過你以前的回答謝謝啦

時間 2021-09-02 02:17:33

1樓:匿名使用者

凝膠層析的固定相是惰性的珠狀凝膠顆粒,凝膠顆粒的內部具有立體網狀結構,形成很多孔穴。

當含有不同分子大小的組分的樣品進入凝膠層析柱後,各個組分就向固定相的孔穴內擴散,組分的擴散程度取決於孔穴的大小和組分分子大小。

比孔穴孔徑大的分子不能擴散到孔穴內部,完全被排阻在孔外,只能在凝膠顆粒外的空間隨流動相向下流動,它們經歷的流程短,流動速度快,所以首先流出;

而較小的分子則可以完全滲透進入凝膠顆粒內部,經歷的流程長,流動速度慢,所以最後流出;分子越大的組分越先流出,分子越小的組分越後流出。

聚丙烯醯胺凝膠電泳不是通過凝膠顆粒內部的孔穴保留小分子的,

聚丙烯醯胺凝膠是通過三維網狀結構分離,所以小分子先出,大分子比較慢出。

不一樣的原理

2樓:匿名使用者

樓主,一樓關於凝膠過濾講解得很詳細也很準確。和凝膠電泳相比,兩者凝膠是不相同的,凝膠過濾常用的凝膠是葡聚醣或是瓊脂糖,也們在形成網狀結構的同時,這些網狀結構上還含有很多孔穴,待分離的混合物經過凝膠時,孔徑小於孔穴的物質進入孔穴,在孔穴間穿梭,流程長,後流出,孔徑大的不進入孔穴,直接在網狀結構的間隙中流動,流程短,先流出。而凝膠電泳最常用的凝膠是聚丙烯醯胺凝膠,這種凝膠形成網狀結構,雖然分離中存在分子篩效應,但是還存在電荷效應(電泳分離化合物的原理是基於物質的大小和所帶的電荷),而且電荷效應佔了主導地位,凝膠主要是給它提供了個支援的介質,所以小分子電泳時,阻力小,移動得快,分子量越大,移動得越慢,電泳結束後,小分子的化合物在最前面,分子量最大的位於最後面,由此將混合物分離開來。

樓主,凝膠電泳,你可以參考這個

有助於理解,希望能幫到你!

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