1樓：
使用高效液相色譜儀進行分析時，常用兩種洗脫方式，一種為等度洗脫，另一種為梯度洗脫。
用等度洗脫進行色譜分離時，由不同溶劑構成的流動相的組成，如流動相的極性、離子強度、ph值等，在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進行色譜分離時，在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動相組成會連續或間歇地改變，其間可調節流動相的極性，改善樣品中各組分間的分離度。
使用梯度洗脫時，也會使干擾分離的強保留雜質組分在較短的時間內從柱中清楚，使色譜柱保持乾淨狀態，以進行下一次的分析。梯度洗脫一般是指流動相的組成隨分析時間的延長呈現線性變化，即線性梯度洗脫，可用於反相和正相高效液相色譜儀及離子對色譜法。
2樓：莫悟軒轅良俊
根據你樣品成分的極性來解釋，同時還要看你使用的正向柱還是反相柱，如果用的是反向色譜柱（c8、c18等），色譜柱填料極性較弱，那麼被分析的物質就是極性大的先出峰；如果用的是正向色譜柱（cn、nh2），色譜柱填料極性較強，那麼被分析的物質就是極性小的先出峰。
3樓：清風異彩
液相色譜原理大多是分配色譜,就是說樣品被固定相（柱子填料）吸附以後,在流動相洗脫過程中,樣品的極性不同,在流動相中溶解的濃度也不同,有的可以互溶,有的不容,有的有一定溶解度.就可以根據這個原理進行分離.與固定相作用時間長的後洗脫，不易吸附的隨著流動相流動最先被洗脫出來
4樓：織就那緩帶輕裘
rf值越大，說明化合物在流動相上走的距離越遠，表明化合物先被洗脫下來，跟著流動相走的早，即rf值越大，先被洗脫，反之，rf值越小，則後被洗脫。 懂了沒~
高效液相色譜法中什麼是洗脫梯度
5樓：匿名使用者
梯度洗來脫（gradient elution）又稱為梯源度淋洗或程式洗脫。在同一個分析週期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。
梯度洗脫的原理： 流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k，並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。
梯度洗脫特點： 提高柱效，改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最後一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。
梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重複結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑a和一個強極性的溶劑b。
如：在60min內，流動相配比從甲醇：水=1：99到甲醇：水=100：0
高效液相色譜法為什麼使用紫外檢測器
歷清婉伍英 建立用高效波相色譜法 hplc 法測定氟康唑注射液的含量及有關物質的方法。方法 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑,ph7.0的磷酸鹽緩衝液 甲醇 55 45 為流動相,檢測波長為260nm。結果 氟康唑注射液在濃度60 140mg l 1 範圍內,溶液的濃度與峰面積呈良好的線性關係。精密度...
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毛細管電泳法比高效液相色譜法柱效高的原因
菸草帶晚鴉 范德姆特方程最常用的形式如下式所示，該式直觀地反映了流動相流速對於分離的影響。式中a,b,c為常數，u表示流動相的流速。h a b u c u a項反映的是被分析物在填充柱中可能採取不同的路徑，因而經過的路程也不一樣長，引起色譜峰的展寬，這就是 多路徑效應 在毛細管開管柱中不存在多路徑效...