1樓：道峰山營
降解無怪乎幾種原因：
1，加入提取液後，若是65度提取，時間太久，有可能造成部分降解。
2，降入氯仿/異戊醇後，劇烈混勻時間太久，造成部分dna斷裂3，打碎組織時最好用液氮處理後研磨的方式，用珠子打碎在後期混勻過程中也容易造成dna斷裂。
簡述ctab法提取植物基因組總dna的原理
2樓：蒯爍
1）取材料，加液氮研磨成粉末狀，迅速移入 ml eppendorf管中；
（2）加入800 μl的ctab提取緩衝液，混勻（ctab在65℃水浴預熱），每5min輕輕**幾次，20min後12000 r/min，離心15 min；
（3）小心吸取上清液，加入等體積的酚：氯仿（各400μl）溶液，混勻，4℃，12000 r/min，離心10 min；
（4）小心吸取上清液，加入等體積的氯仿，混勻，4℃，12000 r/min，離心10 min。
（5）重複步驟（4）1-2次，以蛋白層不出現為止；
（6）取上清，-20℃沉澱1h，4℃，12000 r/min，離心10 min；
（7）棄去上清液，用70%乙醇洗滌沉澱2次；
（8）室溫下乾燥後（一般乾燥5-15 min），溶於30-50 μl depc去離子水中，於-20℃或者-70℃下儲存備用。
3樓：夜楣
首先，你先確定你用ctab法提取植物基因組的dna是否提取出來，你的膠上dna的亮度如何？
如果肯定你的dna沒有問題的話，是不是你的引物有問題？之前有用過同種引物嗎？引物的退火溫。
度是否正確？pcr出不來，是有很多原因的，不是單純的dna的問題。
你先瓊脂糖檢測dna是否有問題？如果dna沒有問題的話，再去看你引物的問題，是不是合適的引物？
如果引物也是對的，再看一下退火溫度。
4樓：網友
ctab法原理 ctab(hexadecyltrimethylammonium
bromide,十六烷基三甲基溴化銨)，是一種陽離子去汙劑，具有從低離子強度溶液中沉澱核酸與酸性多聚糖的特性。在高離子強度的溶液中(> nacl)，ctab與蛋白質和多聚糖形成複合物，只是不能沉澱核酸。
通過有機溶劑抽提，去除蛋白，多醣，酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。
植物基因組提取dna實驗為什麼得到的沉澱偏少？
5樓：網友
因為沉澱是dna或者rna等少量物質，沉澱少說明植物的細胞壁還沒弄破，或者基因組和提取液沒有混合好。
我為什麼最近提取真菌的基因組dna總是提取不出
6樓：昊鑫生物
真菌用溶菌酶沒有，應該是用液氮或者石音沙研磨破壁。
劑盒採用dna吸附柱和新型獨特的溶液系統，適合於從真菌組織細胞中快速簡單地提取基因組dna。可在30分鐘內完成乙個或多個100mg新鮮或20mg乾燥的真菌樣品dna的純化工作。提取過程不需要用到有毒的酚氯仿等有機物抽提，也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉澱，並能快速高效地去除多醣類、酚類和酶抑制物等雜質，純化的dna可直接用於pcr、酶切和雜交等實驗。
新鮮或乾燥的真菌組織（細胞）磨碎後經裂解液裂解；蛋白質、多醣、細胞殘片被沉澱去除；然後基因組dna在高離序鹽狀態下選擇性吸附於離心柱內矽基質膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟， 進一步將多醣，多酚和細胞代謝物，蛋白等雜質去除， 最後低鹽的洗脫緩衝液將純淨基因組dna從矽基質膜上洗脫。
特點：1.離心吸附柱內矽基質膜全部採用進口特製吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重複性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉澱等步驟。
3.快速，簡捷，單個樣品操作一般可在1小時內完成。
4.數種去多醣、多酚成份和多次柱漂洗確保高純度，od260/od280典型的比值達，可直接用於pcr，southern-blot和各種酶切反應。
pcr植物基因組dna，為什麼就一直p不出來捏
7樓：匿名使用者
檢查以下問題：
tag酶是否有問題。
引物設計是否有問題。
基因組dna提取是否有問題。
退火溫度是否太高。
如果別人能p出來你p不出來，引物就沒問題，如果從來沒p出來過，重新設計引物，注意cg含量。
植物基因組dna提取跑膠條帶很寬，是為什麼
8樓：包遐思佟黛
不在同一直線就對了，因為基因組dna都很大，提前過程中難免會被打斷而形成大小不同片段，所以，不同時間提前的同一樣品的基因組dna也不可能完全一樣，會產生不同的條帶。
求生物高手指點，做dna、rna提取實驗時提取的基因組dna有降解，如何解決? 5
9樓：阿伊宴曉
在實驗過程中注意加入edta，因為它是dna的酶抑制劑，dna在變性後，可以防止dna被降解。在加入鹼性溶液破碎細胞後，搖動離心管一定要溫和，不能振盪，盡可能上下顛倒混。並且要注意時間間隔做下一步不要太長，這時候也可能破壞了dna，使其降解，所以一定要把握好時間。
10樓：洛瀾漪
提取的是什麼的dna啊，動物植物還是細菌。實驗過程小心dna酶的汙染，edta注意不能過期，如果可以的話盡量採用液氮研磨提取，如果沒有液氮也要保持低溫，沉澱重懸的時候動作一定要注意輕柔，否則也會破壞dna的完整性，儘量減少蛋白質的汙染，否則會影響dna的進一步操作的。個人提取dna時候的一點經驗，希望對你有幫助。
11樓：網友
不要暴露在空氣中太長時間，dna rna 的提取不要同時進行 因為提取rna的時候用到了dna酶。
提取植物基因組dna是，用無水乙醇沉澱、離心後管底有褐色沉澱。這是怎麼回事啊？請問有什麼方法可以避免
12樓：匿名使用者
正常現象，這是由於在氯仿異戊醇(或苯酚)抽提過程中植物色素等雜質沒有完全抽提乾淨，可以由以下幾個措施避免：
一、用專用的植物dna提取試劑盒，雜質會比較少一點；
二、盡量使用幼嫩的植物組織提取，減少樣品中色素含量；
三、用氯仿異戊醇多抽提幾次，將色素蛋白多醣等雜質萃取乾淨；
四、加乙醇冷凍沉澱後不要離心，用槍頭挑出其中的絮狀dna，可以減少雜質殘留。話說有褐色其實影響也不大，做普通的pcr還是能用的。
血液基因組dna提取試劑盒又叫什麼
血液基因組dna提取試劑盒 操作步驟 一 小體積全血操作步驟如下 400ul全血，以300ul血液處理量為例 1 向300ul抗凝劑的血液中加入2.5倍體積的solution a，顛倒混勻，12000rpm離心1分鐘，棄掉上清。2 再重複步驟1一次，棄掉上清。3 按照第3頁附表配製solution ...
做全基因組測序前，需要檢測dna濃度和純度嗎
巨集基因組是指特定環境中全部生物 微生物 遺傳物質的總和。巨集基因組測序是利用高通量測序技術對環境樣品中全部微生物的基因組進行測定，以獲得單個樣品的飽和資料量，可進行微生物群體的基因組成及功能注釋，微生物群體的物種分類，多樣性分析，群落結構分析，樣品間的物種或基因差異以及物種間的代謝網路研究，探索微...
培養溫度過高對基因組的提取有什麼影響
赤霉素是一種激素，它的成分有可能蛋白質或者氨基酸，又或者是一些細胞的分泌物。都是有基因調控產生的。就比如說細胞中許許多多的酶，而且赤霉素是一類。赤霉素一共有89種。影響dna提取的因素有哪些 材料，溫度，鹽溶液濃度等。dna提取需要注意什麼？1.盛放雞血細胞液的容器，最好是塑料容器。雞血細胞破碎以後...