血液基因組dna提取試劑盒又叫什麼

時間 2021-10-15 00:19:47

1樓:

血液基因組dna提取試劑盒

操作步驟:

一、小體積全血操作步驟如下: <400ul全血,以300ul血液處理量為例

1、向300ul抗凝劑的血液中加入2.5倍體積的solution a,顛倒混勻,12000rpm離心1分鐘,棄掉上清。

2、再重複步驟1一次,棄掉上清。

3、按照第3頁附表配製solution b與solution c的混合液(solution b與solution c的使用量見附表)。

4、加入150ul混合液,用移液器吹打均勻,60℃水浴或孵箱孵育10分鐘,孵育期間顛倒混勻一次,溶液由紅色變為黃綠色或棕色。

5、加入等體積的異丙醇,充分顛倒混勻至出現絲狀或絮狀基因組dna,12000prm離心1分鐘,棄掉上清。

6、加入800ul 75%酒精,顛倒數次;12000prm離心1分鐘,用移液器吸掉上清,室溫乾燥10~15分鐘。

7、加入150ul elution buffer,60℃孵育10~15分鐘或過夜溶解dna,用移液器吹打均勻,-20℃儲存基因組dna。

二、中量全血操作步驟如下: 1~10ml血量,以3ml血液處理量為例

1、向3ml抗凝劑的血液中加入2.5倍體積的solution a,顛倒混勻,3000rpm離心5分鐘,棄掉上清。

2、再重複步驟1一次,棄掉上清。

3、按照第3頁附表配製solution b與solution c的混合液(solution b與solution c的使用量見附表)。

4、加入1.5ml混合液,用1ml移液器或者一次性塑料吸管吹打均勻,60℃水浴或孵箱孵育10分鐘,孵育期間顛倒混勻一次,溶液由紅色變為黃綠色或棕色。

5、加入等體積的異丙醇,充分顛倒混勻至出現絲狀或絮狀基因組dna。

6、用移液器將絮狀物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml ep管中,顛倒數次,12000prm離心3分鐘,棄掉上清,室溫乾燥10~15分鐘。

7、加入500ul elution buffer,60℃孵育10~15分鐘或過夜溶解dna,用移液器吹打均勻,-20℃儲存基因組dna。

三、大量全血操作步驟如下: 10~20ml血量,以10ml血液處理量為例

1、向10ml抗凝劑的血液中加入2.5倍體積的solution a,顛倒混勻,8000rpm離心5分鐘,棄掉上清;

2、再重複步驟1一次,棄掉上清。

3、按照第3頁附表配製solution b與solution c的混合液(solution b與solution c的使用量見附表);

4、加入5ml混合液,用一次性塑料吸管吹打均勻,60°c水浴或孵箱孵育10分鐘,孵育期間顛倒混勻一次,溶液由紅色變為黃綠色或棕色。

5、加入等體積的異丙醇,充分顛倒混勻至出現絲狀或絮狀基因組dna;

6、用移液器將絮狀物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml ep管中,顛倒數次,12000prm離心1分鐘,棄掉上清,室溫乾燥10~15分鐘;

7、加入1000ul elution buffer,60℃孵育10~15分鐘或過夜溶解dna,用移液器或一次性塑料吸管吹打均勻,-20℃儲存基因組dna。

2樓:小醬油

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