常用微生物染色的方法,常見的細菌染色方法

時間 2023-04-25 06:45:05

1樓:網友

檢驗常用染色法包括 1)革蘭氏染色法 2)抗酸染色法 3)美蘭染色法 4)異染顆粒染色法 5)細菌鞭毛染色法 6)莢膜染色法芽孢染色法 7)布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法 8)結核桿菌螢光染色法等主要染色法 革蘭氏染色法染液配製 1。結晶紫染液:稱取結晶紫(龍膽紫)14g,溶於95%酒精100ml中,配成飽和液,再取飽和液20ml與1%草酸銨溶液(1g草酸銨溶於100ml蒸餾水溶解即成)80ml混勻即成2。

盧戈氏碘液:碘化鉀2g於10ml蒸餾水中,再加碘1g,待碘全部溶解後(時間較長)加蒸餾水200ml即成酒精4。

1)石碳酸複紅液:稱取鹼性複紅(鹼性品紅)4g溶於95%酒精100ml中成飽和液,再取飽和液10ml與5%石碳酸溶液(5ml石碳酸溶於100ml蒸餾水)90ml混勻即成,(2)稀釋石碳酸複紅液:取石碳酸複紅液10ml加入蒸餾水90ml即成染色方法:

1。塗片 將菌液直接塗在載玻片上,經培養的菌落要加生理鹽水混勻塗片,等待乾燥(固定)2。將結晶紫染液滴加在已固定的塗片上,染色1分鐘後用水衝去剩餘燃料3。

滴加盧戈氏碘液1分鐘後水洗,在滴加95%酒精脫色,搖動玻片至紫色不在脫色為止(約需1分鐘),水洗4。用稀釋石碳酸複紅液復染30秒至1分鐘5。水洗待幹,鏡檢6。

革蘭氏陽性菌染成紫色,革蘭氏陰性菌染成紅色。

常見的細菌染色方法

2樓:小蠻子的人文歷史觀

常見的細菌染色方法有三種:

1、革蘭氏染色:

革蘭氏染色是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法。細菌先經鹼性染料結晶紫染色,而後經碘液進行媒染,之後用酒精脫色,在一定條件下有的細菌媒染後的顏色不會脫去,有的可以被脫去,前者叫做革蘭氏陽性菌,後者為革蘭氏陰性菌。

2、莢膜染色:

一般細菌的莢膜與染色劑的親和性低,但莢膜通透性高,因此染料可以透過莢膜使菌體著色。一般採用負染色方法使背景和菌體之間形成一透明區,將菌體襯托出來便於觀察分辨。

3、簡單染色:

不同細菌或者由於觀察者所側重觀察的內容不同,所以使用的染料也有差異,但是簡單染色的方法是一樣的。先按照上述的製片方法製片,製成需要觀察的玻片後,使用相對應的染料滴加到玻片上的菌膜區域,以覆蓋菌膜為準。

微生物染色的微生物染色的基本原理

3樓:假面

微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。

酸性物質對於鹼性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,鹼性物質對酸性染料較易於吸附。如酸性物質細胞核對於鹼性染料就有化學親和力,易於吸附。要使酸性物質染上酸性材料,必須把它們的物理形式加以改變(如改變ph值),才利於吸附作用的發生。

相反,鹼性物質(如細胞質)通常僅能染上酸性染料,若把它們變為適宜的物理形式,也同樣能與鹼性染料發生吸附作用。

細菌的等電點較低,ph值大約在2—5之間,故在中性、鹼性或弱酸性溶液中,菌體蛋白質電離後帶陰電荷;而鹼性染料電離時染料離子帶陽電。因此,帶陰電的細菌常和帶陽電的鹼性染料進行結合。所以,在細菌學上常用鹼性染料進行染色。

4樓:冼秀雋

你是指格蘭仕染色的話,其原理如下:

通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚醣網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚醣層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚醣網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

微生物鑑別染色方法有哪些

5樓:北京索萊寶生物

檢驗常用染色法包括 1)革蘭氏染色法 2)抗酸染色法 3)美蘭染色法 4)異染顆粒染色法 5)細菌鞭毛染色法 6)莢膜染色法芽孢染色法 7)布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法 8)結核桿菌螢光染色法等主要染色法 革蘭氏染色法染液配製 1。結晶紫染液:稱取結晶紫(龍膽紫)14g,溶於95%酒精100ml中,配成飽和液,再取飽和液20ml與1%草酸銨溶液(1g草酸銨溶於100ml蒸餾水溶解即成)80ml混勻即成2。

盧戈氏碘液:碘化鉀2g於10ml蒸餾水中,再加碘1g,待碘全部溶解後(時間較長)加蒸餾水200ml即成酒精4。

1)石碳酸複紅液:稱取鹼性複紅(鹼性品紅)4g溶於95%酒精100ml中成飽和液,再取飽和液10ml與5%石碳酸溶液(5ml石碳酸溶於100ml蒸餾水)90ml混勻即成,(2)稀釋石碳酸複紅液:取石碳酸複紅液10ml加入蒸餾水90ml即成染色方法:

1。塗片 將菌液直接塗在載玻片上,經培養的菌落要加生理鹽水混勻塗片,等待乾燥(固定)2。將結晶紫染液滴加在已固定的塗片上,染色1分鐘後用水衝去剩餘燃料3。

滴加盧戈氏碘液1分鐘後水洗,在滴加95%酒精脫色,搖動玻片至紫色不在脫色為止(約需1分鐘),水洗4。用稀釋石碳酸複紅液復染30秒至1分鐘5。水洗待幹,鏡檢6。

革蘭氏陽性菌染成紫色,革蘭氏陰性菌染成紅色。

微生物的染色原理是什麼?

6樓:左丘任

g+菌:細胞壁厚,肽聚醣網狀分子形成一種透性障,當乙醇脫色時,肽聚醣脫水而孔障縮小,故保留結晶紫-碘複合物在細胞膜上。呈紫色。

gˉ菌:肽聚醣層薄,交聯鬆散,乙醇脫色不能使其結構收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結晶紫-碘複合物溶出細胞壁,沙黃復染後呈紅色。

細菌有哪些染色方法?

7樓:雙藹梅冷萱

1革蘭氏染色法。

是最常用的鑑別染色法之一。此法起始2023年,染色步驟是先用結晶紫或龍膽紫染液加於已固定好的標本上使之著色,其後加碘液作媒染劑,再用酒精脫色,最後用復紅或沙黃復染。革蘭氏染色的結果與培養基成分、培養條件及操作技術等有密切關係。

如塗片太厚影響酒精脫色,革蘭氏陰性菌則可染成革蘭氏陽性菌。脫色時若酒精作用時間太長,革蘭氏陽性菌又會染成革蘭氏陰性菌。在缺乏鎂鹽的培養基中,革蘭氏陽性菌可變成革蘭氏陰性菌。菌齡也能影響染色的結果,這與生長過程中核酸含量的改變有關。

革蘭氏染色法的原理還不十分清楚,有化學學說、等電點學說、滲透性學法,目前最通常的解釋是革蘭氏陽性菌在95%酒精中因含粘肽多而導致細胞壁脫水,通透性減低,使在細菌細胞內著色的染料─碘複合物不易透出細胞壁,所以保留了紫色;革蘭氏陰性菌含粘肽少,其細胞壁在95%酒精作用下通透性變化不大,酒精容易進入菌體內溶解染料─碘複合物而透出,失去紫色後被復染成為紅色。

2抗酸染色法。

有些細菌,如結核桿菌,不般不易著色,一旦染上色後又不易被鹽酸酒精脫色,稱為抗酸菌。主要步驟是將細菌塗片、乾燥、固定後,以石炭酸複紅染液加溫進行染色,然後用含酸的酒精脫色,最後用美藍復染。一般細菌以及標本中的物質都被脫色,抗酸菌則不能,仍為紅色。

在藍色背景上呈紅色的細菌即為抗酸菌。

3細菌特殊結構的染色法。

細菌的特殊結構,如鞭毛、莢膜、細胞壁、芽孢及異染顆粒等,用普通染色法不易著色,故需用特殊染色法。

4負染色法。

是指背景著色而細菌本身不著色。常用墨汁負染色法配合單染色法(如美藍)檢查細菌的莢膜,背景呈黑色,菌體染成藍色,www..com

莢膜不著色,包繞在菌體周圍,成為一層透明的空圈。

5螢光染色法。

用螢光染料,如金胺、吖啶橙等進行染色。細菌用螢光染料著色後在螢光顯微鏡下檢查,可在黑的背景中觀察到細菌發出明亮的螢光。用螢光染色法檢查細菌,有加快檢查速度和提高陽性率等優點。求採納。

觀察細菌形態時為何要用染色法?常用的染色法有幾類

8樓:聽風

觀察細菌形態時為何要用染色法?因為細菌細胞微小,透明,不易觀察,需染上顏色。利用單一染料對細菌進行染色,使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差,從而能更清楚地觀察到其形態和結構。

常用的染色法有:

1.簡單染色法:簡單染色法是利用單一染料對細菌進行染色的一種方法, 一般用於觀察個體形態與細菌排列。

由於細菌在中性、鹼性或弱酸性環境中帶負電荷,所以通常採用一種鹼性染料如美藍、鹼性複紅、 結晶紫對細菌進行染色。美藍是美藍的鹽酸鹽,可解離為帶正電荷的美藍,很容易與細菌結合使菌體著色。染色後的細菌細胞與背景形成鮮明的對比,在顯微鏡下更易於識別。

簡單染色過程:塗片→固定→染色→水洗→乾燥→鏡檢。

塗片→ 固定→ 乾燥→ 水洗、吸乾→鏡檢→染色 1mim

2.革蘭氏染色法:

革蘭氏染色法是由丹麥醫生 hans christian gram於 1884 年創立。它是細菌學中很重要的鑑 別染色法,因為通過此法染色,可將細菌鑑別為革蘭氏陽性菌(g + 和革蘭氏陰性菌(g - 兩大 類。

革蘭氏染色過程:塗片→固定→結晶紫初染(1min)→碘液媒染(1min)→乙醇脫色(95% 酒精,30s)→番紅復染(30 秒)→乾燥→鏡檢。

陽性菌:紫色; 陰性菌:紅色。

給細菌染色的方法都有幾種,怎麼操作,都用複紅染色

9樓:匿名使用者

簡單染色法:利用單一染料對細菌進行染色的一種方法。例如番紅。

1.塗片:用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻,塗成極薄的菌膜。

2.乾燥:可自然晾乾,或將塗片置於火焰高處微熱烘乾,但不能直接在火焰上烘烤。

3.固定:手執玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過迅速通過火焰2-3次(用手指觸塗片反面,以不燙手為宜).

4.染色:加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸複紅液),染l~2min.

5.水洗:用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止。

6.乾燥。7.鏡檢。

復染色:利用用兩種以上染料對細菌進行染色。例如革蘭氏染色法。

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,需要鹼性染料(basic dye)初染液;媒染劑(mordant);脫色劑(decolorising agent)和復染液(counterstain).

鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫(crystal violet).媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘(iodine )是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同型別的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol).

復染液也是一種鹼性染料,其顏色不同於初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,而且將細胞區分成g+和g-兩大類群,常用的復染液為番紅。

1.載玻片固定。在無菌操作條件下,用接種環挑取少量細菌於乾淨的載玻片上塗佈均勻,在火焰上加熱以殺死菌種並使其粘附固定。

2.草酸銨結晶紫染1分鐘。

3.自來水沖洗,去掉浮色。

4.用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘,傾去多餘溶液。

5.用中性脫色劑如乙醇(95%)或丙酮酸脫色30秒,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。

6.用番紅染液或者沙黃復染30秒,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現紅色。

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