sds page 跑蛋白的菌液處理?(具體見說明,請勿複製)

時間 2022-02-01 18:18:57

1樓:匿名使用者

marker看你買的是什麼樣的,有的還是粉末狀呢,那個用水溶解後也需要加loading buffer沸水浴處理的。不過現在賣的很多都是那種直接點樣的。說明書一般都有說的,一般10微公升。

loading buffer就是上樣緩衝液的英文。

另外,你的實驗步驟裡面,你打錯了,第三步是10000rpm*2min,我非常肯定這個步驟一定是高速離心。

第乙個步驟,我們一般取1ml菌液離心10000rpm*5min吧,具體記得不太清楚了。然後加loading buffer好像是120微公升,1倍的,100微公升也ok啦,然後沸水浴5到10分鐘,然後高速離心,點樣。為了避免串樣,維持各點樣孔之間的那種壓力吧,具體怎麼說我記不清楚了,反正就是防止別的孔的樣品跑到空白泳道,很難看的。

所以在空白處也點上1倍的loading buffer

你按照乙個固定的數字做下來,點樣的時候開始要摸索一下,多點幾個樣,看看點多少微公升合適,因為你的菌液濃度什麼的我們也不知道。你要有條件,可以給蛋白定量,因為跑電泳蛋白濃度過高會很難看,濃度低了看不清楚。

2樓:匿名使用者

我來回答吧 上樣緩衝液 or loading buffer這個就是是一樣的,收集完菌體就只加這個就行

loading buffer加多少都是自己定的 看你的菌體有多少 一般你要是3 4 ml菌液離心後的菌體加30-50ul就行

你光說板的厚度了 沒說梳子大小啊 一般上15-30ul吧 看你梳子了 不要上太多 梳子小的話10ul也可以

看到最後我明白了 你的梳子是那種只有兩個孔的那種,乙個小的乙個大的,那你上揚上多少要看你的梳子能裝多少了 你問的太抽象了

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