RT PCR如何用來分析基因的時空表達?

時間 2025-03-07 03:35:20

1樓:閎藹允方

即時定量pcr,因為rt-pcr過程中可以通過螢光標記強弱分析基因的表達關係,表達量高的螢光強。

哪位高手可以指教:請問可以用rt-pcr螢光定量試劑盒檢核酸位dna的樣品嗎

2樓:網友

你的意思是模板為基因組gdna對吧?!

只要引物設計的可以在基因組上做,那麼理論上是沒問題的!

只需要用rt-pcr螢光定量試劑盒裡面的第二個,專門用來做real-timepcr的那些試劑就可以了!

為什麼pcr擴基因全長時前後要空200bp左右,前後一小段會影響該基因功能?表達?

3樓:月令樓

如果實驗方案是這麼設計的,那就表明pcr後續的測序是準備用pcr引物來做,那這200bp左右的片段就是用來「緩衝」測序結果的,因為測序的初始幾十個鹼基對和末端的幾十個鹼基對是測不好的,所以200bp就是為了防止這個加上去的。看你後半句話的意思,你這段序列是打算做表達的了,一般情況下要做表達的片段是不會直接測序而是連進載體裡再測序的,像這樣預留出200bp的話應該是在表達序列的兩端加進去了酶切位點以便往載體裡連,如果沒有加那肯定會影響它的表達和功能的。

如何選擇絕對定量rt-pcr的資料統計分析方法

4樓:網友

根據正態、方差齊、樣本量等選擇分析方法。

我替別人做這類的資料分析蠻多的。

rt pcr怎樣檢測基因表達水平

5樓:網友

半定量。用cdna樣品對內參基因擴增(迴圈數<=30),通過一次次調節cdna濃度,直至內參基因在所有cdna樣品中擴增亮度相同;用此時的cdna擴增你的基因。出現的不同亮度即為最終結果。

用rt-pcr檢測5個基因的表達水平要花多少錢

6樓:南京金益柏生物科技****

泛泛的說沒有意義,因為基因不同引物設計難度和引物大小不同,以及之後的pcr難度都不相同,所以費用差別很大。建議諮詢可以做的,不過5個基因的話,**也不要多少錢。

rt-pcr是提取dna還是rna

7樓:匿名使用者

dna(pcr)只能證明有這個基因,不能證明這個基因表達與否,只有rna(rt-pcr)才能看出基因表達與否。二者排列組合可以出現3種情況:(1)dna與rna都陽性,說明有這個基因,並且目前表達。

2)dna陽性,rna陰性,說明有這個基因但目前不表達。(3)dna陰性(不應寫成「dna表達陰性」)而rna表達陽性,如果做的是哺乳動物組織標本應該是不會出現的。但其他標本可能不一定。

如病毒就有分dna病毒和rna病毒。一般來說,看哺乳動物組織標本某種基因是否表達,應該提取rna來做。

除以上講的外。在研究遺傳病時,dna與rna都做可以起到互相驗證的作用。如分析乙個病人某基因dna,發現某個外顯子中有乙個鹼基發生點突變,可以使蛋白質的氨基酸改變或者形成提前終止密碼子等。

可以再提取rna,查查mrna是不是有同樣的結果。這裡提示一下,人體rna一般是沒有內含子的。這在小基因不重要。

如果是有很多外顯子的大基因(很難用乙個pcr擴出整個基因),查其中某個外顯子dna有沒有突變,引物常設計在該外顯子兩端的內含子中。而查rna時,引物是設計在該外顯子兩側的外顯子上,當然也可以在幾個相連外顯子片段的兩側甚至包含整個rna,這樣擴增片段就大一些。

RT PCR的原理是什麼?有何用途

劉夢真唯一 原理 利用pcr高度的特異性,通過特定的引物能在複雜樣品中得到的特定序列的dna,而這種特定dna的產量跟反應初始階段模板量是直接相關的。簡單說來。經過一個pcr迴圈,可以把一個模板變成兩個,在經過一個迴圈,就會變成四個,以此類推。如果pcr的檢測線是1000個產物,那麼當你的初始樣品中...

如何用spss分析量表的效度,如何用spss分析一個量表的效度

首先分析kmo值 接著分析題項與因子的對應關係,如果因子與題項對應關係與預期不符,再考慮刪除題項重新分析,如果kmo達標以及題項與因子對應關係與預期基本吻合,就說明效度良好。 郭某人來此 相信你也知道,效度是指,測量工具能確切測得其所欲測量的特質之程度,它的測定大體可以分為內容效度 表面效度 準則效...

如何用spss進行問卷信度分析,如何用SPSS進行問卷的信度檢驗

鄧蕊珠揭玉 信度分析一般針對主觀態度類的量表問卷,在資料上必須要求每題統一標準來計分,因為在量表中有反響題和正向題,在錄入資料時必須將所有問題都按照統一的方向計分,要麼統一按正向,要麼統一按反向計分,這樣才可以來做信度分析 信度分析操作 analyze scale reliability analy...