1樓:匿名使用者
第一步:首先看ori的位置,瞭解質粒的型別(原核/真核/穿梭質粒)
ori的箭頭指複製方向,其他元件標註的箭頭多指轉錄方向(正向)。
第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什麼篩選標記:
(1)ampr:水解β-內醯胺環,解除氨苄的毒性。
(2)tetr :可以阻止四環素進入細胞。
(3)camr:生成氯黴素羥乙醯基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉移酶,使g418(卡那黴素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮黴素β失活。
第三步:看多克隆位點(mcs)。它具有多個限制酶的單一切點,便於外源基因的插入。
如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標誌基因的失活,而便於篩選。決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源dna插入片段大小。質粒一般只能容納小於10kb的外源dn**段。一般來說,外源dn**段越長,越難插入,越不穩定,轉化效率越低。
第五步:是否含有表達系統元件,即啟動子-核糖體結合位點-克隆位點-轉錄終止訊號。這是用來區別克隆載體與表達載體。
克隆載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用那種載體,還是要以實驗目的為準繩。
質粒圖譜怎麼看 基本特徵有哪些
2樓:養你過年吃肉
個人bai認為,看質粒圖譜,
du1,該質粒的用途:篩zhi選,擴增
dao,表達,還版是報告?用一種低權拷貝數的質粒來擴增目的片段顯然不如高拷貝的質粒效率高;
2,質粒的宿主:原核質粒?酵母質粒?真核細胞質粒?
3,使用有無特殊要求:抗性,營養缺陷?
4,關鍵是研究:多克隆位點,上下游的限制酶位點是否合適,對於你要插入的目的片段,是否有高效、經濟的酶切位點;啟動子是什麼誘導機制?起始密碼子和終止子的位置?
如果插入你的目的片段,是否會移碼或提前終止?
5,如果你選用的是比較冷僻的限制酶,在多克隆位點外是否有該酶的酶切位點;
6. 標籤蛋白序列或報告基因序列在插入片段的上游還是下游?對後續實驗有無影響?祝好!
如何提高閱讀的速度,如何提高閱讀速度和閱讀質量
如果想要提高速度其實也很簡單 特別是 類 一般類似於景色之類的東西 完全可以一帶而過 主要看的內容就是人物之間的對白 主要的主線流程 其實你每看完一本小薯畝說 就算看的時候再仔細 當你回想的時候你就發現也就能記住頌世主要的事情經過和特殊的劇情 流程 再說的明白點 那些形容詞完全可以一掃而過 畢竟再華...
如何提高閱讀能力,如何提高古文閱讀能力?
沒有別的辦法,只有多讀多想 你出現這個問題,說明你對文章的理解不夠深。你只是從表面理解了文章在講什麼。解決的辦法,其實就是思考。看完文章,肯定已經清楚文章的結構,那就去思考,作者為什麼這樣安排結構,目的何在。哪部分是著重突出或者重點強調的,對這部分再做重點領會。如何提高古文閱讀能力?一 提高古文閱讀...
請問如何提高閱讀速度。如何提高閱讀速度?
為什麼你讀書和沒讀一樣?快來試試這個方法吧 邊看邊想 別眼走腦子不走。如何提高閱讀速度?二 閱讀的時候要帶著目的去閱讀,讓精神注意力更為集中,安靜的閱讀環境很重要。三 每次閱讀完要記得對所讀內容進行總結,做讀書筆記。所謂引導閱讀法,就是用一根手指或一支筆來引導著自己的視線進行閱讀。具體的用法就是,在...