有人用crisprcas9系統做細胞基因敲除嗎交流下

時間 2021-09-12 03:10:29

1樓:匿名使用者

是的,確切來說是大量表達。 大腸桿菌是基因重組技術中常用的細菌,將外源目的基因(如人胰島素基因)匯入大腸桿菌後可在大腸桿菌內表達目的蛋白(如胰島素),由於細菌繁殖速度快,通過發酵便可在短時間內獲得大量胰島素,再經多步分離、純化便得到了藥用胰島素。

2樓:長不大的憨憨

origene公司最新推出基因組編輯工具「crispr/cas9系統」,該系統靈活簡單、可以對特定基因組位點進行切割置換的,特異性高、細胞毒性低。crispr/cas9系統是利用cas9核酸酶在嚮導rna的指引下通過識別基因組的任何位點保守的間隔相鄰基序(pam,序列為ngg),在pam的上游對dna進行定點切割。 使用pcas-guide系統可以很簡便的為內源性基因標記標籤。

除此之外,pcas-guide系統的供體載體(rescue donor vectors)也可以用於其他的基因組工程,如基因抑制(突變,缺失,插入),用於啟動子研究的螢光素酶報告基因置換或綠色螢光蛋白基因置換,基因敲入以及用於**的基因修復等。

crisprcas9精細原理基因敲除點突變基因插入解讀

3樓:

敲除:在外顯子上設計grna引導cas9切割,造成雙鏈斷裂,當缺失的鹼基數為3的倍數,修復後可發生移碼突變

敲入:grna和cas9複合物造成靶位點dna雙鏈斷裂後,細胞以外源攜帶敲入片段的donor作為模板進行同源重組修復(hdr),將敲入片段重組到基因組靶點。

點突變:grna和cas9複合物造成靶位點dna雙鏈斷裂後,細胞以外源攜帶目標點突變的donor作為模板進行同源重組修復(hdr),將目標點突變重組到基因組靶位點。

crispr/cas9基因敲除細胞文庫運用舉例?

4樓:匿名使用者

基因編輯的技術很多的,crispr/cas9基因敲除技術只是其中一種,而crispr/cas9基因敲除細胞文庫是將質粒匯入到細胞中進行基因改造的一種方式,運用範圍還是比較廣泛。該項技術可以運用到細胞凋亡研究,腫瘤的研究等等。

crispr/cas9 基因敲除動物模型怎麼做

crispr/cas9基因敲除,敲入怎麼做,原理

5樓:泉州指南針生物

crispr/cas9可謂是目前基因編輯領域最熱門的明星工具,從2023年張鋒教授結合crispr技術和二代測序技術開發了對人類全基因組的crispr敲除文庫,並在腫瘤細胞系上利用該文庫進行了抗藥基因的篩選。在獲得陽性基因的基礎上獲得了新的抗性基因,發表在了science雜誌上。到目前,中國在crispr領域的研究處於世界領先水平,國家基因的申報中頻發出現crispr/cas9技術的應用,含有這項技術的文章也更容易發表高分文章。

有人用crispr/cas9系統做細胞基因敲除嗎交流下

6樓:匿名使用者

自做基敲除物或細胞需要摸索條件並且裝置限找平台做高效優質建議找碧基cas9做塊非專業

7樓:小何老師

crispr/cas9技術做基因敲除確實是現目前的熱點,研究成果也是比較新穎的。你主要是做哪方面的研究呢?實驗模型構建好了嗎?

敲除這塊,可以做的很多,比如全部knock out、或者敲低knock down,當然還有knock in,至於如何選擇實驗方案,需要根據你的實驗方向,實驗條件等來確定。除此之外,還能做乙個敲除,多個多次敲除,甚至是一次批量敲除,根據你的實驗週期選擇最適合自己的實驗方案。

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