1樓：匿名使用者
real time pcr不用跑膠
2樓：
前者可以實時定量啊。。。。用於檢測mrna的表達水平的 跑膠也是為了比較亮度 後者是為了擴增目的片段的 跑膠是為了**的
3樓：法師藥材店
real time pcr一般是不用跑膠的，普通pcr一般都需要通過跑膠來確定結果。但有時候real time pcr完成後有些人為了更確定實驗結果也會跑一下。 如果說區別的話，對於同乙個基因來說real time pcr為了提高擴增效率（往往迴圈數比較多），設計的引物都只能擴增出較小的片段，而同一基因的普通pcr擴增的片段往往會大一些。
也就是說跑出的條帶二者是有差別的。當然，如果你直接用普通pcr的引物去跑real time pcr的話，結果基本會是一致的，當然，由於迴圈數的不同，亮度也會有差別。
ps：普通pcr也是可以用在做定量的，雖然不精確，但做基因表達量的話光乙個real time pcr結果，很多高檔次的刊物一些老外審稿們往往不認可，需要你做乙個普通的反轉錄pcr來作為輔證。
4樓：
實時螢光定量pcr 是靠螢光訊號來檢測 最初的cdna含量，不需要跑膠。
實時螢光定量pcr跑膠與普通pcr有區別嗎
5樓：月醉瀟湘
real time pcr不用跑膠
6樓：龍鳳油洺月
沒有區別，都可以跑膠，不過一般沒有人跑。電泳的精密度哪有rtpcr高啊
實時螢光定量pcr 引物與普通pcr一樣嗎
7樓：匿名使用者
實時定量的引物設計要求比較高，可以按普通引物設計的方法來做，但是設計時要注意擴增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定量的意義了
8樓：匿名使用者
不是一回事 螢光pcr是為了檢測mrna表達水平 所以只要在整條mrna上選取特異性好的一段兩百bp左右的序列擴增就可以了 普通pcr是為了擴增特定的片段或者基因 設計在哪是要看你需要擴增哪部分的
9樓：匿名使用者
螢光是定量判定起始模板濃度的..跟普通pcr引物是一樣的 不同的只是反應中加入了探針或者燃料用於實時監控~！
pcr跑膠的目的是找到目的片段，我們怎麼知道哪個是我們要的目的片段呢
10樓：
電泳時一定讓樣品和marker一起跑，根據位置確定片段大小，根據比對其他物種相應片段的大小，推測其是否可能是目的片段。 常用的dna marker有：λ / hindiii dl5000
11樓：
還可以檢測擴增的特異性。電泳時跟marker一起跑，根據位置確定片段大小，根據比對其他物種相應片段的大小，推測其是否可能是目的片段，當然，最終的確定是根據測序結果。
----中國西部生命科學論壇
12樓：匿名使用者
1 預先已知到目的片段的大小，pcr跑膠驗證該大小的片段是否跑出來，點marker就可以區別；
2 預先未知到目的片段的大小，比如5『race pcr，這將出現的片段（一般是最大的條帶）轉殖，測序，然後看是不是所要的帶
13樓：匿名使用者
設計引物的時候你就應該知道是多大片段了啊，不然你的引物是怎麼設計出來的？
螢光定量pcr的引物能直接跑普通pcr嗎?
14樓：匿名使用者
能，就是注意和引物二聚體區別：大小問題，一般螢光定量的在80-300bp；二聚體在最底部~
15樓：匿名使用者
可以的 不過擴增出來的片段也就一兩百bp，要用2%的瓊脂糖膠跑電泳檢測
16樓：
能。一般大家都會在做定量前跑個普通的pcr看看引物的特異性
實時螢光定量pcr不需要跑膠嗎
17樓：匿名使用者
不需要，不需要用瓊脂糖凝膠驗證。因為實時定量pcr那個儀器可以檢測螢光強弱，比膠要靈敏。假如用膠檢測mrna表達量，就不用螢光燃料，直接普通pcr就可以
實時螢光定量pcr和定量pcr有什麼區別
18樓：匿名使用者
實時螢光是反應螢光數值定量，普通那種是通過條帶半定量，現在做半定量的已經很少了，除非是一些驗證試驗必須要圖的
實時螢光定量pcr與基本pcr相比有什麼優點
19樓：杏雀烈
螢光定量pcr與普通pcr相比具有以下優點：
1、高靈敏性 可檢測單個細胞基因；
2、高特異
20樓：匿名使用者
普通的pcr大多數是定性實驗，而實時螢光定量pcr則定量和定性都可以做。應用領域也不一樣，普通pcr一般應用於基因組轉殖、dna測序、rna反轉錄等，而實時螢光定量pcr一般應用於mrna表達量分析、絕對定量、蛋白表達、snp分析、陰陽性解析等領域。不是定量pcr比pcr好，而是兩者應用與不同的領域，起到了不同的作用。
螢光定量pcr較普通pcr不同的一點就是可以實時檢測pcr擴增產物，從而可進行絕對定量或者相對定量。
21樓：奔馬的香香豬
pcr實驗主要採用sybr green染料法和taqman探針法，biog技術採用經化學修飾的熱啟動聚合酶，有效避免了非特異擴增，具有高度的特異性。反應緩衝液經多次優化，與熱啟動聚合酶具有最為樂觀的搭配，使聚合酶的活性能夠得到最大程度的發揮。反應靈敏快速，40個迴圈只需20多分鐘的時間。
在20ul的反應體系裡，只要有幾個拷貝的dna分子就能被檢測出來。
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