1樓：匿名使用者
用專門的試劑盒來做吧，然後按照說明書操作，挺方便的。我們實驗室以前用的biog熒光定量pcr試劑盒，反應挺靈敏的，實驗結果也不錯，而且染料法和探針法都有。
2樓：匿名使用者
可以用引物設計軟體，primer5就挺不錯的。你是要檢測dna還是rna？探針法檢測dna的話可以用biog super probe kit，檢測rna的話可以用biog super prob one step kit。
普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
3樓：匿名使用者
一、方法不同
來1、普自通pcr引物設計：引物的優劣直接關係到pcr的特異性與成功與否。
2、熒光定量pcr引物設計：通過熒光染料或熒游標記的特異性探針，標記跟蹤pcr產物進行實時監測反應，利用與之相適應的軟體對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度
二、原理不同
1、普通pcr引物設計：為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板dna序列。
2、熒光定量pcr引物設計：在pcr反應體系中加入熒光基團，通過熒光訊號不斷累積而實現實時監測pcr全程，然後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量pcr中，對全程pcr擴增過程進行實時檢測，根據反應時間和熒光訊號的變化可以繪製成一條曲線。
三、注意事項不同
1、普通pcr引物設計：引物應用核酸系列保守區內設計並具有特異性。產物不能形成二級結構。引物長度在15~30鹼基之間。
2、熒光定量pcr引物設計：實時熒光定量 pcr 儀應安放在溼度較低、灰塵較少、遠離水池的平穩檯面上，不能有強光直射，室內應通風良好，無腐蝕性氣體
4樓：南京金益柏生物科技****
實時定量bai的引物設計du要求比較高，可
以按zhi普通引物設計的方法來做，dao但是回設計時要注意擴增的片段答不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
5樓：
實時定量的引物抄
設計要求比較高，可以按普通bai引物設計的方法來做，但du是設計時要注zhi意擴增的片段dao不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
6樓：
建議來你還是選擇cds區不一自樣的地方設計bai引物吧，這樣可以避免du交叉汙染引起zhi的非特異擴增，dao擴增的序列長度不一定要一樣，每個引物你最好設計兩三對，然後做一個相對定量看看不同引物的擴增效率，選擇比較好的兩對引物做後續試驗，內參基因的引物不需...
7樓：
nf-kbmrna不就是nf-kb的mrna麼 做定量pcr就是測它mrna的表達量啊 nf-kbp65是nf-kb3 nf-kbp52是nf-kb2 所以這兩個還是有區別的 如果你是要檢測65的話
引物設計時如何新增酶切位點，PCR引物前面如何加酶切位點
1 新增額外的鹼基序列，即保護鹼基，用來提高將來酶切時的活性。新增保護鹼基，需要考慮兩個因素 一是鹼基數目，一是鹼基種類。不同內切酶對識別位點以外最少保護鹼基數目的要求。2 相鄰的兩個酶切位點不同時使用。在分子轉殖實驗中選擇載體的酶切位點時，相鄰的兩個酶切位點往往不能同時使用，因為乙個位點切割後留下...
如何正確的選擇熒光定量PCR儀，解析熒光定量PCR儀選擇有哪些要點及誤區
定量的儀器建議買進口的，技術相對成熟一些，而且產地也要在國外。有很多進口品牌是在國內設廠的需要注意，一定要國外原裝進口的。然後就是 有的 高，有的 低，相同 下就看效能了。就像買手機一樣，高階的手機很多功能根本用不上，低端的又根本不能用，選擇最合適自己的。進口品牌主要由life 伯樂 roche t...
實時熒光定量PCR儀國產有哪些,價格及相關技術引數
東林的觸屏pcr儀不錯，新品上市，8英寸高解析度觸控式螢幕 具有高度靈活性，多種模組容量選擇，滿足多種實驗需求。到鼎國生物瞭解諮詢吧。 biosaferpcr儀引數參考 1 樣品臺 標準模組 96 0.2ml 77 0.5ml混合模組 可另選384well模組a 96 0.2ml模組b 54 0.5...