1樓：做人要夠狂
dna一般以雙鏈的形式存在，而且雙鏈的比單鏈的穩定。
dna的複製需要雙鏈開啟，同樣，pcr擴增也需要單鏈的模板，所以就有了pcr引物這個東西，引物簡單來說就是一引路的，告訴聚合酶「吶，就從這裡開始」。pcr的基本過程包括變性、退火和延伸。dna的雙鏈主要是靠氫鍵聯絡在一起，高溫時，氫鍵很容易就被斷開了，雙鏈變成了單鏈，提供了pcr的模板。
當然解旋酶也可以做到斷裂氫鍵，尚且不考慮溫度，我只需考慮 1.酶活，酶活是有限的，如果酶量不足，是否會影響到最終的產量，酶都不便宜。2.
pcr需要引物，如果使用解旋酶，是否會把引物從模板上裂解下來？
熱變性dna一般經緩慢冷卻後即可復性,簡單來說，復性不就是兩條互補的單鏈變成雙鏈嗎，所以根據這個特性，完全可以在dna聚合酶的作用下把已經和引物結合在一起的模板鏈複製出來。所以，pcr必然有有乙個溫度變化的過程。一般來說dna在高溫中容易變性，這就決定了使用的聚合酶必須是耐高溫的。
2樓：孫孫灰灰
無法控制複製的程序。就是說，如果用解旋酶，會不停地「解旋——複製」。而且最終得到的只是單鏈，所以一定要高溫（我覺得這樣更正確點）
3樓：匿名使用者
解旋酶在高溫下會變性，而pcr是在高溫下進行的
4樓：匿名使用者
隨後pcr技術在生物科研和臨床應用中得以廣泛應用，成為分子生物學研究的最重要pcr反應用耐高溫的taq dna聚合酶，一次性地將反應液加好後，即在dna擴增液
5樓：匿名使用者
pcr中dna
變性是在高溫的的步驟下進行，所以要用耐高溫的。
6樓：手機使用者
lz很有想法啊，你提的這個問題是現在新發展的一種pcr技術，搜helicase-dependent amplification (hda)有相關的介紹
pcr技術中為什麼不用解旋酶 10
7樓：匿名使用者
原因如下：
1、解旋酶一般只能開啟很短一部分的dna雙螺旋，在具體pcr操作的時候無法控制其具體在什麼時間。
2、不能保證dna解旋酶解開dna的那段時間足夠長以便讓引物和模板結合，而且引物和模板結合後，解旋酶還能立刻移開以免阻礙dna合成酶的前進。
聚合酶鏈式反應為一種用於放大擴增特定的dn**段的分子生物學技術，可看作是生物體外的特殊dna複製，pcr的最大特點是能將微量的dna大幅增加。
擴充套件資料：
標準的pcr過程分為三步：
1、dna變性：（90℃-96℃）：雙鏈dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈dna。
2、退火：（60℃-65℃）：系統溫度降低，引物與dna模板結合，形成區域性雙鏈。
3、延伸：（70℃-75℃）：在taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dntp為原料，從引物的3′端開始以從5′→3′端的方向延伸，合成與模板互補的dna鏈。
8樓：北京索萊寶科技****
之所以不用解旋酶是因為難以控制。
解旋酶一般只能開啟很短一部分的dna雙螺旋，在具體pcr操作的時候無法控制其具體在什麼時間開啟那一段dna，更無法控制其具體能作用多少時間。詳細一點說，我們沒有辦法知道dna解旋酶開啟的是模板dna與引物結合的部分，還是不結合的部分，還是乾脆分開了和模板結合的引物；我們也不能保證dna解旋酶解開dna的那段時間足夠長以便讓引物和模板結合，而且引物和模板結合後，解旋酶還能立刻移開以免阻礙dna合成酶的前進；我們更沒法讓dna在複製的過程中，dna解旋酶一直走在複製叉的前方來幫助dna複製等等。有很多不可控的因素使得我們現階段不可能在體外讓dna解旋酶按照我們希望的模式來工作。
在細胞內，解旋酶需要dna複製複合物（下圖）的幫助才可以精密地調節dna的複製，在體外實驗中，每多引入一種蛋白質就會讓實驗體系更加複雜、更加難以控制、更加高成本，所以dna變性的工作就都交給高溫了。
9樓：匿名使用者
dna雙鏈的解旋是邊解旋邊複製，單鏈不能存在很長時間就復性了。而且解旋酶在體外作用的條件也比較負責，成本比較高。
pcr的意義在於大量的得到gene拷貝，還是高溫變性效果穩定，成本低。
當然也許你所提的是乙個更好的idea
學術無禁區
10樓：
pcr儀其實就是乙個高階的「電爐子」，它可以瞬間的公升高或降低溫度，大約每秒種6攝氏度。
第一步：高溫解旋，大約加溫到90多度吧（大概是），dna雙鏈氫鍵斷裂瞬間解旋
第二步：退火，你應該聽說過吧，pcr儀大約在十秒之內吧溫度降到60多度，這時「引物」會搶在雙鏈形成氫鍵之前結合上去。
第三步：dnmp開始結合上去，合成開始了，都是5'端向3'端進行，不會出現岡奇片斷，因為dna已經解開了，哈哈
pcr技術為什麼一定要高溫，為何不用普通dna聚合酶？如何進行迴圈的？引物可以再生？普通dna聚合酶可以起始 10
11樓：
pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：
①模板dna的高溫變性：模板dna經加熱至93℃左右一定時間後，使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；
②模板dna與引物的低溫退火(復性)：模板dna經加熱變性成單鏈後，溫度降至55℃左右，引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合；
③引物的適溫延伸：dna模板--引物結合物在taqdna聚合酶的作用下，以dntp為反應原料，靶序列為模板，按鹼基配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板dna 鏈互補的半保留複製鏈。
重複迴圈變性-退火-延伸三過程，就可獲得更多的「半保留複製鏈」，而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成乙個迴圈需2～4分鐘， 2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
12樓：
高溫是將dna中的氫鍵斷裂。
普通dna聚合酶在高溫下失活。
所以要用耐高溫的dna聚合酶
13樓：匿名使用者
一般來說雙鏈dna需要熱變性才能解旋成單鏈，有單鏈才能跟引物結合進而進行複製，所以pcr過程中必然要有變溫過程，這就需要有耐高溫的聚合酶。
pcr由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成乙個週期，高溫下雙鏈解旋成單鏈，然後退火，使引物與單鏈模板結合，再在聚合酶的適溫下進行延伸，將dntp按照模板連加到引物上面，這就是乙個迴圈。
對於複製出的新dna單鏈，由於引物序列已知，可以通過具有特異識別位點的內切酶將引物切下來，再用電泳純化，但是對於這一過程不要想得太理想。
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