使用PCR技術前提「一段已知目的基因的核苷酸序列」如何理解

時間 2021-08-30 09:11:21

1樓:斑馬魚高中生物

教材上這句話太坑爹了,表述不準確。

很多大學《生物化學》教材上是這樣表述的:如已知目的基因兩端的序列,則可採用聚合酶鏈反應技術,在體外合成目的基因。【這才是人話!】

2樓:旅元斐肥庚

pcr,成為聚合酶鏈式反應技術。就是我有一基因片段(稱為目的基因),數量太少,我現在想要讓他變成好多,怎麼辦,就用pcr技術給他擴增,變成好多。

已知目的基因的核苷酸序列,就是這段基因的atcg怎麼排列,數量多少,我都這道了,因為在pcr技術中涉及到高溫變性,中溫退火,中溫退火的溫度需要根據cg的含量按公式計算

3樓:浦竹青柏己

應該是要知道目的基因它的核苷酸序列,因為用pcr擴增一段基因需要先知道它的序列從而製出相應的引物。另外,目的基因不是一定是確定的嗎,然後才通過pcr技術只擴增目的基因那一段序列,而其他部分的基因則不擴充。反應最初是加入含有目的基因的一段基因片段,不需知道其位置,引物可以使酶從目的基因兩端契入,從而開始複製。

契入的酶相向移動,但補鏈的確只朝同一方向,似乎是正向移動的酶合成的是一段段不連續的片段,逆向的則是在間斷處停留並將之補全連線(這點我也不是很確定......)

4樓:聶士恩芮午

根本上說是已知核苷酸序列。如果序列知道了,它在什麼基因上也就知道了(可以通過blast搜尋的)。pcr的過程是這樣的,你首先需要化學合成兩條短的單鏈dna序列,叫引物(可以直接叫一些公司幫你合成),這兩條序列分別在互補鏈上,並且指向對方。

pcr時需要把大量的引物加到反應體系中去,這樣最終擴增出來的序列就是引物及其之間的dna序列。之所以要已知序列(只需要知道兩端的序列),就是為了設計引物(與要擴增的dn**段兩端的序列相同),不知道序列是無法設計引物的,也就不無擴增出目的dna來。

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