1樓：匿名使用者
1.根據實驗需要選擇合適的表達載體。
要考慮的問題：
使用什麼樣的啟動子？要不要與報告基因組成融合蛋白？有沒有純化蛋白的考慮？
2.根據表達載體的多轉殖位點擊擇合適的限制性內切酶位點，確保cdna序列中沒有這些位點。
3.設計帶有這些酶切位點的pcr引物，以cdna為模板，擴增其編碼序列（從起始密碼子到終止密碼子的部分）
需要絕對注意的問題：如需表達融合蛋白，切記不能讓插入片段（報告基因在前）或插入片段以後（報告基因在後）的序列發生移碼。可通過在引物上新增補齊鹼基來解決。
其它需要注意的：引物5『端至少加3個保護鹼基，否則下一步無法進行。
4.pcr產物和載體質粒同時用對應限制性內切酶進行切割，**酶切產物。
5.插入片段和線性化載體按3：1的比例，使用t4dna連線酶進行連線。4度過夜。
6.連線產物轉化大腸桿菌，塗對應抗生素lb平板。37度培養過夜後，挑取單轉殖菌落接入少量含抗生素的lb培養基，37度搖床上培養過夜。
7.收集菌液中的菌體，抽提質粒。得到的質粒用同上的內切酶進行酶切，酶切產物跑瓊脂糖電泳進行鑑定，能切出大小符合要求的條帶者保留。
8.將保留的質粒測序，插入片段與原cdna序列相比無突變者即需要的重組質粒，可進一步擴大培養。
2樓：匿名使用者
你要告訴大眾，你的基因功能如何，然後是什麼物種，適合什麼轉基因方法，然後通過轉基因驗證其功能。
一同學要結婚了，我該送禮嗎，一同學要結婚了，我該送禮嗎？ 10
你媽是媒人，你又不是，你應該送個禮物給你女同學。至於送什麼，應該看她的個人愛好了，你們非常要好肯定知道她喜歡什麼了。 既然都倒黴了一年了嘛，又何必在乎繼續倒黴呢？也說不定自此就不倒黴了呢！我們那邊沒有媒人送禮會倒黴的說法。至於送什麼禮嘛，最好的就是能知道她最近需要什麼，有沒有什麼是她非常想要的但是又...
控制某一性狀或功能的基因如何篩選
皇家大腸桿菌 首先要構建一個群體，如果是植物 特別是作物 還好說點。一般用含有目標基因 表型 的親本和沒有相應性狀的標記的親本的雜交後代構建群體。一般而言，如果是質量遺傳的單孟德爾基因，用f2群體就夠了。然後篩選大量兩親本間存在差異的標記，包括分子標記和表型標記等下面要在對群體的每一個系 如果是f2...
我一同學山東理科生高考考了525分想問一下他能去什麼大學省外的幾個可以冒險的然後再一下省內
獨 愛 濟南大學 文科軍檢線上可以報考，高出5分把握較大 理科軍檢線上10分有希望錄取，高出15分把握較大。濟南走讀生文科510分有希望錄取，520分把握較大。理科525分至530分可以報考。山東政法學院 過了二本線報考比較有希望，超過軍檢線把握比較大。山東交通學院 500分以上報考比較有希望。山東...