1樓：北京索萊寶生物
一、\x09目的：在細胞發放之前,利用標準的革蘭氏染色法對即將發放的細胞懸液進行檢測,判斷細胞懸液中是否含有革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌.
二、\x09原理：
通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚醣網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚醣層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚醣網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色.
三、實驗用品準備：
滅菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul滅菌移液吸頭、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸頭、接種環、酒精燈、打火機、革蘭氏染色液、吸水紙、顯微鏡、香柏油、擦鏡紙、計時器
四、\x09操作：
1 塗片：取滅過菌的載玻片於實驗台上,用移液槍吸取10ul待檢樣品滴在載玻片的**,用燒紅冷卻後的接種環將液滴塗佈成一均勻的薄層,塗佈面不宜過大.
2 乾燥：將標本面向上,手持載玻片一端的兩側,小心地在酒精燈上高處微微加熱,使水分蒸發,但切勿緊靠火焰或加熱時間過長,以防標本烤枯而變形.
3 固定：固定常常利用高溫,手持載玻片的一端,標本向上,在酒精燈火焰處盡快的來回通過2-3次,共約2-3秒種,並不時以載玻片背面加熱觸及**,不覺過燙為宜（不超過60℃）,放置待冷後,進行染色.
4 初染：在塗片薄膜上滴加草酸銨結晶紫1-2滴,使染色液覆蓋塗片,染色約1min.
5 水洗：斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止.
6 媒染：用100-1000ul移液槍吸取約300ul碘液滴在塗片薄膜上,使染色液覆蓋塗片,染色約1min.
7 水洗：斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止.
8 脫色：斜置載玻片,滴加95%乙醇脫色,至流出的乙醇不現紫色為止,大約需時20-30s,隨即水洗.
9 復染：在塗片薄膜上滴加沙黃染液1-2滴,使染色液覆蓋塗片,染色約1min.
10 水洗：斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止.
11 乾燥、觀察：用吸水紙吸掉水滴,待標本片幹後置顯微鏡下,用低倍鏡觀察,發現目的物後滴一滴浸油在玻片上,用油鏡觀察細菌的形態及顏色,紫色的是革蘭氏陽性菌,紅色的是革蘭氏陰性菌
2樓：匿名使用者
結晶紫、95%乙醇、番紅、魯戈氏碘液
革蘭氏染色的步驟和原理
3樓：鵝子野心
操作步驟：
1 ．塗片
將培養的不同菌分別作塗片（注意塗片切不可過於濃厚），乾燥、固定。固定時通過火焰1一2 次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。
2 ．染色
( 1 ）初染加草酸鉸結晶紫一滴，約一分鐘，水洗。
( 2 ）媒染滴加碘液衝去殘水，並覆蓋約一分鐘，水洗。
( 3 ）脫色將載玻片上面的水甩淨，並襯以白背景，用95 ％酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現紫色時為止，約20 一30 秒鐘，立即用水沖淨酒精。
( 4 ）復染用番紅液染1 一2 分鐘，水洗。
( 5 ）鏡檢乾燥後，置油鏡觀察．革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以分散開的細菌的革蘭氏染色反應為準，過於密集的細菌，常常呈假陽性。
( 6 ) 同法在一載玻片上以大腸桿菌與枯草芽孢桿菌混合製片，作革蘭氏染色對比。
革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結果，如陽性菌培養時間過長，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈陰性反應。
原理：革蘭氏染色反應是細菌分類和鑑定的重要性狀。它是1884 年由丹麥醫師gr 二創立的。
革蘭氏染色法（gram stain ）不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類：染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用g＋表示：染色反應呈紅色（復染顏色）的稱為革蘭氏陰性細菌，用g 一表示。
細菌對於革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由膚聚醣形成的網狀結構組成的，在染色過程中，當用乙醇處理時，由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫一碘複合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中膚聚醣含量低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫一碘複合物易被乙醇抽出而脫色，然後又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色。
革蘭氏染色需用四種不同的溶液：鹼性染料（basic dye ）初染液；媒染劑（mordant ) ；脫色劑( decolorising agent ）和復染液（counter stain ）。鹼性染料初染液的作用象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣，而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫（crystal violet ）。
媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力，即以某種方式幫助染料固定在細胞上，使不易脫落，碘（iodine ) 是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色，不同型別的細胞脫色反應不同，有的能被脫色，有的則不能，脫色劑常用95 ％的酒精（ethanol ）。復染液也是一種鹼性染料，其顏色不同於初染液，復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色，而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色，從而將細胞區分成g ＋和g 一兩大類群，常用的復染液是番紅。
4樓：林與潘
一、 目的：在細胞發放之前，利用標準的革蘭氏染色法對即將發放的細胞懸液進行檢測，判斷細胞懸液中是否含有革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
二、 原理：
5樓：張鈺濤
步驟：包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。
原理：染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑑定。
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法，2023年由丹麥醫師gram創立。未經染色之細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑑定。
革蘭氏染色屬復染法。
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法，這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭(hans christian gram，2023年-2023年)於2023年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係。
未經染色之細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察陽性紫色陰性紅色。染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑑定。
革蘭氏染色原理及步驟，革蘭氏染色的步驟和原理
9421劉聰 革蘭氏染色反應是細菌分類和鑑定的重要性狀。它是1884 年由丹麥醫師gr 二創立的。革蘭氏染色法不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類 染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用g 表示 染色反應呈紅色 復染顏色 的稱為革蘭氏陰性細菌，用g 一表示。細菌對於革蘭氏染色的不同...
什麼是革蘭氏染色法？這種染色法在細菌的鑑定上有何重要意義
由子細菌細胞壁的結構和組成不同，用革蘭氏染色法可將細菌分離為革蘭氏陽性菌 g 和革蘭氏陰性菌 g 兩類。g 的細胞壁主要友肽聚醣形成的網狀結構組成，用乙醇脫色時細胞壁脫水，肽聚醣層的網狀結構孔徑縮小，透性降低，結晶紫一碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內，經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。由g 細胞...
革蘭氏染色需要注意哪些問題為什麼
老藝術家 革蘭氏染色需要注意哪些問題 1.選用活躍生長期菌種染色，老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。2.塗片 不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性。3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。原理 通過結晶紫初染和碘液媒染後，在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫...