1樓：匿名使用者
蛋白質含量測定方法有：凱氏定氮法，雙縮脲(biuret)法，酚試劑法(lowry)法，考馬斯亮藍（bradford）法，紫外吸收法，bca法及杜馬斯燃燒法。 其中bca法與bradford法成為當今實驗室最為常用的兩種蛋白濃度定量檢測方法。
bca法常用現成的試劑盒來做，操作簡單又穩定。以下是厚百上bca蛋白定量試劑盒：
厚百holdbio提供生物試劑、耗材等全面實驗室用品及實驗技術服務，科研整體服務（課題設計-實驗-sci）。
2樓：匿名使用者
概述：目前常用的有四種古老的經典方法，即定氮法，雙縮尿法（biuret法）、folin－酚試劑法（lowry法）和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法，即考馬斯亮藍法（bradford法）。
其中bradford法和lowry法靈敏度最高，比紫外吸收法靈敏10～20倍，比biuret法靈敏100倍以上。定氮法雖然比較複雜，但較準確，往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標準蛋白質。
注意點：值得注意的是，這後四種方法並不能在任何條件下適用於任何形式的蛋白質，因為一種蛋白質溶液用這四種方法測定，有可能得出四種不同的結果。每種測定法都不是完美無缺的，都有其優缺點。
在選擇方法時應考慮：①實驗對測定所要求的靈敏度和精確度；②蛋白質的性質；③溶液中存在的干擾物質；④測定所要花費的時間。
考馬斯亮藍法（bradford法），由於其突出的優點，正得到越來越廣泛的應用。
生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些?
3樓：玲
① 鹽析法
一般來說，所有固體溶質都可以在溶液中加入中性鹽而沉澱析出，這一過程叫鹽析。在生化製備中,許多物質都可以用鹽析法進行沉澱分離，如蛋白質、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白質沉澱最為常見，特別是在粗提階段。
鹽析法分為兩類，第一類叫ks分段鹽析法，在一定ph和溫度下通過改變離子強度實現，用於早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法，在一定離子強度下通過改變ph和溫度來實現，用於後期進一步分離純化和結晶。
② 有機溶劑沉澱法
有機溶劑的沉澱機理是降低水的介電常數，導致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最後析出。該法優點在於：1）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉澱；2）沉澱不用脫鹽，過濾較為容易；3）在生化製備中應用比鹽析法廣泛。
其缺點是對具有生物活性的大分子容易引起變性失活，操作要求在低溫下進行。總體來說，蛋白質和酶的有機溶劑沉澱法不如鹽析法普遍。
有機溶劑的選擇首先是能和水混溶，使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮，還有二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。
③ 其他沉澱法
一．等電點沉澱法
兩性電解質分子上的淨電荷為零時溶解度最低，不同的兩性電解質具有不同的等電點，以此為基礎可進行分離。如工業上生產胰島素時，在粗提液中先調ph8.0去除鹼性蛋白質，再調ph3.
0去除酸性蛋白質。
利用等電點除雜蛋白時必須瞭解製備物對酸鹼的穩定性，不然盲目使用十分危險。 不少蛋白質與金屬離子結合後，等電點會發生偏移，故溶液中含有金屬離子時，必須注意調整ph值。 等電點法常與鹽析法、有機溶劑沉澱法或其他沉澱方法聯合使用，以提高其沉澱能力。
二．生成鹽複合物沉澱法
1．金屬複合鹽法
許多有機物質包括蛋白在內，在鹼性溶液中帶負電荷，能與金屬離子形成沉澱。根據有機物與它們之間的作用機制，可分為羧酸、胺及雜環等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如概鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。 蛋白質-金屬離子複合物的重要性質是它們的溶解度對溶液的介電常數非常敏感，調整水溶液的介電常數（如加入有機溶劑），即可沉澱多種蛋白。
2． 有機鹽法
含氮有機酸如苦味酸、苦酮酸、鞣酸等能與有機分子的鹼性功能團形成複合物而沉澱析出。但此法常發生不可逆的沉澱反應，故用於製備蛋白質時，需採用較溫和的條件，有時還需加入一定的穩定劑。
3．無機複合鹽法
如磷鎢酸鹽、磷鉬酸鹽等。
以上鹽類複合物都具有很低的溶解度，極易沉澱析出。若沉澱為金屬複合鹽，可通以h2s使金屬變成 硫化物而除去，若為有機酸鹽或磷鎢酸鹽，則加入無機酸並用乙醚萃取，把有機酸和磷鎢酸等移入乙醚中除去，或用離子交換法除去。值得注意的是此類方法常使蛋白質發生不可逆沉澱，應用時必須謹慎。
三． 選擇性變性沉澱
其原理是利用蛋白質、酶和核酸等生物大分子對某些物理或化學因素敏感性不同，有選擇地使之變性沉澱，以達到分離提純的目的。
此方法可分為：1）利用表面活性劑(三氯乙酸)或有機溶劑引起變性；2）利用對熱的不穩定性,加熱破壞某些組分，而儲存另一些組分；3）酸鹼變性。
四．非離子多聚物沉澱法
非離子多聚物是六十年代發展起來的一類重要沉澱劑，最早用於提純免疫球蛋白、沉澱一些細菌和病毒，近年來逐漸廣泛應用於核酸和酶的分離提純。這類非離子多聚物包括不同分子量的聚乙二醇、npeo、葡聚糖、右旋糖酐硫酸鈉等，其中應用最多的是聚乙二醇。
用非離子多聚物沉澱生物大分子和微粒，一般有兩種方法：1）選用兩種水溶性非離子多聚物組成液液兩相體系，不等量分配，而造成分離。此方法基於不同生物分子表面結構不同，有不同分配係數。
並外加離子強度、ph值和溫度等影響，從而擴大分離效果。2）選用一種水溶性非離子多聚物，使生物大分子在同一液相中，由於被排斥相互凝聚而沉澱析出。該方法操作時先離心除去大懸浮顆粒，調整溶液ph值和溫度至適度，然後加入中性鹽和多聚物至一定濃度，冷貯一段時間，即形成沉澱。
4樓：淘歌
能把問題描述的更具體點麼？處理，是要去掉活性，還是要保護活性，或者是完全清除？
5樓：佛翼慎源源
一。蛋白質沉澱方法
1.中性鹽鹽析法
⑴在一定的
ph值及溫度條件下，改變鹽的濃度（即離子強度）達到沉澱的目的，稱為“ks”分級鹽析法。
（ks鹽析：固定ph,
溫度，改變鹽濃度）
⑵在一定的離子強度下，改變溶液的ph值及溫度，達到沉澱的目的，稱為“β”分級鹽析法。
（β鹽析：固定離子強度，改變ph及溫度。）
2.等電點沉澱法
蛋白質等電點沉澱法是基於不同蛋白質離子具有不同等電點這一特性，依次改變溶液ph值的辦法，將雜蛋白沉澱除去，最後獲得目標產物。
3.有機溶劑沉澱法
許多能與水互溶的有機溶劑如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈，常用於低鹽濃度下沉澱蛋白質。
4.非離子型聚合物沉澱法
20世紀60年代非離子型聚合物開始用於分離血纖維蛋白原和免疫球蛋白，從此高相對分子質量非離子聚合物沉澱蛋白質的方法被廣泛使用，如：聚乙二醇（peg）、聚乙烯吡咯烷酮（pvp）、葡聚糖等。
5.金屬沉澱法
能與羧基、胺基等含氮化合物以及含氮雜環化合物強烈結合的金屬離子，如：mn2+、fe2+、co2+、ni2+、cu2+、zn2+、cd2+；
能與羧酸結合而不與含氮化合物結合的金屬離子，如：ca2+、ba2+、mg2+、pb2+；
與巰基化合物強烈結合的金屬離子，如：hg2+、ag+、pb2+。
實際使用時，金屬離子的濃度常為0.02
mol/l。
6.親和沉澱
初始階段：將一個目標蛋白質與鍵合在可溶性載體上的親和配體絡合成沉澱；
所得沉澱物用一生中適當的緩衝溶液進行洗滌，洗去可能存在的雜質；
用一種適當的試劑將目標蛋白質從配體中離解出來。
7.選擇性變性沉澱法
（1）例如對於α-澱粉酶等熱穩定性好的酶，可以通過加熱進行熱處理，使大多數雜蛋白受熱變性沉澱而被除去。
（2）根據欲分離物質所含雜質的特性，通過改變ph值或加進某些金屬離子等使雜蛋白變性沉澱而被除去。
8.反膠束萃取蛋白質
菌體細胞提取
固液分離是生物產品生產中的重要單元操作。培養基、發酵液、某些中間產品和半成品等都需進行固液分離。發酵液由於種類多、粘度大及成分複雜，其固液分離最為困難。
固液分離的方法很多，生物工業中常規的方法有分離篩、重力沉降、浮選分離、離心分離和過濾等，其中用於發酵液固液分離的方法主要是離心分離和過濾。
二。超濾膜濾去。
怎樣測量生物樣品中蛋白質的含量,其機理是什麼生物化學
6樓：匿名使用者
蛋白質中含氮元素的量是相對穩定的，一般在13%--19%之間，一般取16%，做簡單推算
分子分母導致一下就是6.25，即：檢查到1克氮元素就可以推斷該樣品中含有6.2克蛋白質，
實踐中檢測氮元素的一種實驗方法叫做凱氏定氮法
生物樣品去除蛋白質的方法有哪些
7樓：我們飛哈
看是什麼樣品了，還有你對蛋白質去除的要求嚴格不嚴格。一般dna或是rna是用酚氯仿去除。也可以加蛋白酶k消化。
生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些
一。蛋白質沉澱方法。1.中性鹽鹽析法。在一定的。ph值及溫度條件下，改變鹽的濃度 即離子強度 達到沉澱的目的，稱為 ks 分級鹽析法。ks鹽析 固定ph,溫度，改變鹽濃度 在一定的離子強度下，改變溶液的ph值及溫度，達到沉澱的目的，稱為 分級鹽析法。鹽析 固定離子強度，改變ph及溫度。2.等電點沉澱...
什麼食物蛋白質比較高，什麼食物中蛋白質含量最高？
什麼食物含蛋白質最高？許多人都知道，蛋白質對於人體具有十分重要的作用，是人體必需的營養物質，同時由於日常生活習慣的問題，導致了許多人都不太注意蛋白質補充，因而不少保健品品牌都有設立蛋白質相關保健品的情況。其實，有許多食物的蛋白質含量都比較高，無需可以進行補充，下面就給大家看一下，蛋白質含量高的食物。...
100克牛肉中含多少蛋白質，牛肉蛋白質含量是多少？
你好，牛肉100克中含20.2克蛋白質。牛肉含有豐富的蛋白質，氨基酸，其能提高機體抗病能力，對生長發育及術後 病後調養的人在補充失血和修復組織等方面特別適宜。牛肉是世界第三消耗肉品，約佔肉製品市場的25 落後於豬肉 38 和家禽 30 蛋白質的補充適合哪類人群 我們在選擇補充蛋白質的時候，建議食用優...