1樓:傷萍
i→吲哚試驗
原理某些細菌有色氨酸酶,能分解蛋白腖中的色氨酸形成吲哚(靛基質),吲哚能與對二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈紅色。
實驗方法
試劑盒法:將對二甲基氨基苯甲醛加入細菌蛋白腖水培養液中。(注:不能搖晃試劑盒)
試管法:以接種環將待檢菌新鮮斜面培養物接種於dunham氏蛋白腖水溶液中,置37℃培養24~48h(可延長4~5d);於培養液中加入戊醇或二甲苯2~3ml,搖勻,靜置片刻後,沿試管壁加入ehrlich氏或kovac氏試劑2ml。
斑點試驗法:將一片濾紙放在培養皿的蓋子上或一張載玻片上,滴加1~1.5ml試劑液於濾紙上使其變濕,取18~24h瓊脂平板培養物塗佈於浸濕的濾紙上,在1~3min內觀察。
試驗結果
試劑盒法:呈紅色反應,形成玫瑰吲哚,為吲哚試驗陽性。不出現紅色則為陰性。
試管法:出現紅色顏色變化為陽性。不出現紅色則為陰性。
斑點試驗法:棕色的試劑由紫紅變為紅色者即為陽性。
m→甲基紅(mr)試驗
原理某些細菌在糖代謝過程中,分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸進一步被分解成為甲酸、乙酸、琥珀酸等,使培養基ph下降至4.5以下,加入甲基紅指示劑可呈紅色。如細菌分解葡萄糖產酸量少,或產生的酸進一步轉化為其他物質(如醇、醛、酮、氣體和水),培養基ph在5.
4以上,加入甲基紅指示劑呈橘黃色。本試驗常與v-p試驗一起使用,因為前者呈陽性的細菌,後者通常為陰性。
試驗方法
取一種細菌的24h培養物,接種於葡萄糖蛋白腖水培養基中,置37℃培養48~72h,取出後加甲基紅試劑(甲基紅0.02g,95%酒精60ml,蒸餾水40ml)3~5滴,立即觀察結果。如果培養液呈紅色者為陽性,橙色者為可疑,黃色者為陰性。
試驗結果
培養液呈紅色者為陽性,橙色者為可疑,黃色者為陰性。
v→二乙醯(v-p)試驗
原理某些細菌能發生如下轉換:葡萄糖→丙酮酸(脫羧)→乙醯甲基甲醇(acetymethyl carbinol)→2,3—丁烯二醇(2,3—bytaylene cylycol),在有鹼存在時氧化成二乙醯,後者和腖中的胍基化合物起作用產生粉紅色的化合物。本試驗目的在於測定細菌產生乙醯甲基甲醇的能力。
大腸埃希菌與產氣腸桿菌均能分解葡萄糖,產酸產氣,為區分兩菌可採用v-p試驗及甲基紅試驗。
試驗方法
o』meara』s法:將被檢細菌接種於葡萄糖蛋白腖水培養基後,於35~37℃培養48h,於每毫公升培養物中加入0.1ml試劑(40g koh溶於100ml蒸餾水中,加入0.
3g肌酐即成),猛烈搖振混合。
baritt』法:同上法接種培養細菌,於2ml培養液內加入甲液(6%α-萘酚酒精溶液)1ml和乙液(40% koh)0.4ml,搖振混合。
試驗結果
試驗時強陽性者約於5min後,可產生粉紅色反應。如長時間無反應,置室溫過夜,次日不變者為陰性。
c→枸櫞酸鹽利用試驗
原理當細菌利用銨鹽作為唯一氮源,並利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源時,若細菌能利用這些鹽作為氮源和碳源而生長,則能利用枸櫞酸鈉產生碳酸鹽,從而與利用銨鹽產生的氨反應,形成nh4oh,使培養基呈鹼性,使指示劑溴麝香草酚藍(btb)由淡綠轉為深藍。
試驗方法
simmons氏培養基法:將被檢細菌少量接種到培養基中,37℃培養2~4d,觀察培養基顏色變化。
christenten氏培養基法:將被檢細菌少量接種到培養基中,接種時先劃線後穿刺,孵育於37℃觀察7d,觀察培養基顏色變化。
實驗結果
simmons氏培養基法:培養基變藍色,陽性;不變,陰性。
christenten氏培養基法:培養基變紅色,陽性;不變(黃色),陰性。
參考資料:http://baike.
2樓:匿名使用者
imvic試驗 用於鑑別細菌種類,吲哚(i)、甲基紅(m)、vp(v)、枸櫞酸鹽利用(c)四種試驗合稱imvic試驗
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