1樓：星星快快星星
1定義編輯
最初，人們只是運用脂質體模擬生物膜，研究膜的構造及功能，從而發現了膜的融合及內吞作用，因而可用作外源物質進入細胞的載體。
2特徵編輯
陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用將dna分子包裹入內，形成dna一脂複合體，也能被表面帶負電荷的細胞膜吸附，再通過膜的融合或細胞的內吞作用，偶爾也通過直接滲透作用，dna傳遞進入細胞，形成包涵體或進入溶酶體其中一小部分dna能從包涵體內釋放，並進入細胞質中，再進一步進入核內轉錄、表達。
已有眾多的文獻報道，脂質體本身會參與細胞生理活動,引起基因表達的上調或下調。如參與pkc（蛋白激酶c）通路調節(biochemistry.1992 sep 22;31(37):
9025-30)；如抑制atp酶的活性(biochim biophys acta.2008 apr;1777(4):362-8)；如與線粒體膜發生作用(j biol chem.
1989 jan 25;264(3):1508-15)；轉染sirna造成脫靶效應等等。細胞毒性的大小往往意味著對細胞生理活動影響的大小，脂質體這些作用是造成細胞毒性的根本原因。
這會對相關研究資料產生嚴重的干擾，甚至影響研究的結論。這已引起了許多研究者的注意。
雖然人們早已發現脂質體對細胞的毒性，對研究的影響，但由於一直沒有更好的方法尤其是更高效的轉染方法代替脂質體，所以脂質體轉染試劑一度應用非常廣泛。同時，人們也一直在尋找更有效、毒性小同時對研究影響也小的轉染試劑。由於脂質類轉染試劑對細胞的毒性是由其脂質特性決定的，眾多的研究者和生物公司將新一代轉染試劑的開發聚焦在非脂質體的聚合物上，一種奈米材料的聚合物已經研發出來，其原理是：
分子內含有許多氨基，在生理ph下會發生質子化，這些質子化的氨基可以中和dna質粒表面的負電荷，使dna分子由伸展結構壓縮為體積相對較小的dna粒子，幷包裹在其中，使dna免受核酸酶的降解。轉染複合物主要是通過細胞內吞作用將dna轉移進入細胞，形成內含體(endosome)，dna從內含體釋放，進入細胞質中，再進一步進入核內轉錄、表達。通過奈米技術生產出的轉染試劑在奈米尺度表現出結合保護dna能力強、毒性低的獨特效能。
細胞轉染原理
2樓：鄭厚
細胞 轉染是指將外源分子如dna，rna等匯入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷髮展，轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中，其應用越來越廣泛。
簡介轉染 ，是將外源性基因匯入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。
電穿孔法、顯微注射和基因槍屬於通過物理方法將基因匯入細胞的範例；化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉澱法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。
理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介導的轉染技術，是目前轉染效率最高的方法，同時具有細胞毒性很低的優勢。但是，病毒轉染方法的準備程式複雜，常常對細胞型別有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。
其它物理和化學介導的轉染方法，則各有其特點。
需要指出的一點，無論採用哪種轉染技術，要獲得最優的轉染結果，可能都需要對轉染條件進行優化。影響轉染效率的因素很多，從細胞型別、細胞培養條件和細胞生長狀態，到轉染方法的操作細節，都需要考慮。
方法脂質體轉染法
陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將dna分子包裹入內，形成 dna脂複合物，也能被表面帶負電的細胞膜吸附，再通過融合或細胞內吞進入細胞。脂質體轉染適用於把dna轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前實驗室最方便的轉染方法之一，其轉染率較高，優於磷酸鈣法。由於脂質體對細胞有一定的毒性，所以轉染時間一般不超過24小時。
常用細胞型別：cos-7 、bhk、nih3t3 、hela等。
電穿孔轉染法
電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使dna分子進入胞內，這種方法就是電穿孔。當遇到某些脂質體轉染效率很低或兒乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。一般情況下，高電場強度會殺死50%-70% 的細胞。
現在針對細胞死亡開發出了一種電轉保護劑，可以大大的降低細胞的死亡率，同時提高電穿孔轉染效率。
病毒感染
對於脂質體轉染與電穿孔轉染都無法成功轉染的細胞系建議用病毒感染，此法可以快速100%感染，檢測成功率高。
真核質粒轉染與脂質體轉染有什麼不同？
3樓：匿名使用者
轉入質bai粒的原理：質粒上連的片段轉du錄後能夠自身互補zhi形成雙鏈（daoshrna），在細胞內版被細胞自己剪下權成sirna。
兩種轉染方法在功能上是一致的。但是sirna轉染以後發揮作用的時間較短，用於短期抑制試驗（一般維持一週以內）。而因為質粒存在於細胞內比較穩定（載體上含有抗生素標記，可以篩選），能夠持續表達產生shrna，然後不斷產生新的sirna，因此維持作用的時間長（可以超過兩週）。
另外用質粒還可以同時轉入報告基因作為對照，確定質粒確實已經轉染進去了。
用質粒好還是還是質粒脂質體共轉染還是腺病毒好些
4樓：匿名使用者
轉入質粒的原理：質粒上連的片段轉錄後能夠自身互補形成雙鏈（shrna）,在細胞內被細胞自己剪下成sirna.
兩種轉染方法在功能上是一致的.但是sirna轉染以後發揮作用的時間較短,用於短期抑制試驗（一般維持一週以內）.而因為質粒存在於細胞內比較穩定（載體上含有抗生素標記,可以篩選）,能夠持續表達產生shrna,然後不斷產生新的sirna,因此維持作用的時間長（可以超過兩週）.
另外用質粒還可以同時轉入報告基因作為對照,確定質粒確實已經轉染進去了.
脂質體的結構及用途如何？
懸浮細胞病毒轉染鋪6孔板要多少細胞
一般用rfect做24孔板轉染的前一天接種 鋪板 細胞計數大約5 10 4cell ml 轉染前細胞密度在30 50 如果細胞是原代細胞，接種密度可以密一些，細胞計數在2 10 6cell ml 懸浮細胞可以在轉染當天接種 鋪板 細胞計數大約5 10 4cell ml 待細胞狀態穩定後做轉染前細胞密...
293T細胞轉染，293T細胞為什麼經常用於轉染 蛋白質表達？
文庫精選 內容來自使用者 xieexin 細胞轉染實驗1 實驗目的 學習和掌握外源基因匯入真核細胞的主要方法 脂質體介導的轉染。瞭解外源基因進入的一般性方法，觀測外源蛋白的表達 綠色熒光蛋白 為染色準備實驗材料。2 實驗原理 transfect 上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖，它顯示了外源質粒進入...
細胞轉染後，再培養7或8天收集細胞，那麼長時間，細胞不就擠死了嗎
細胞轉染可以 1 真核細胞可以摻入外源dna而獲得新的遺傳標誌 2 應用於轉基因動植物 3 應用於生物製藥 基因 rna干擾。脂質體介導法 實驗原理 上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖，它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法 電擊法 磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊...