1樓:故事還長
內毒素,即脂多糖或lps,是革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌)細胞膜的組成部分。細菌外膜的外層脂質部分是完全由內毒素分子所構成的。單個大腸桿菌細胞約包含兩百萬個lps分子,每個lps分子由疏水的脂質a(lipid a)部分、複雜的糖類殘基陣列部分及負電性的磷酸基團所組成。
因此,每個內毒素分子都具有疏水域、親水域和電荷域,這使它在與其他分子相互作用時具有其獨特的自身性質。細菌在其活性生長期向其周圍微環境中散佈少量的內毒素,在死亡時則釋放大量內毒素。
在質粒製備的細菌細胞裂解過程中,內毒素分子被從外膜釋放到溶菌液中。
去除內毒素
獲得專利的endofree plasmid製備方法在標準的qiagen plasmid純化方案中整合了對內毒素的去除步驟。使用qiafilter cartridge過濾中性的細菌裂解液,並加入專門的不含內毒素緩衝液(緩衝液er)在冰上進行共同孵育。不含內毒素緩衝液能夠避免lps分子與qiagen-tip中的樹脂結合,從而使每微克質粒dna中含有的內毒素少於0.
1eu。
2樓:匿名使用者
現在有很多便捷的試劑盒啦,幫助實驗室科研人員節約大量寶貴的時間,選成熟可靠的biog去內毒素質粒提取試劑盒就可以解決您的問題。
為什麼提質粒用去除內毒素試劑盒
3樓:索萊寶生物
內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁(cell wall)上的特有成分,主要是脂多糖中的類脂a,在細菌被裂解時被釋放出來,由於其化學結構和特性,在質粒的純化過程中很容易混入質粒dna一同提取出來。內毒素的存在會嚴重的影響質粒轉染細胞的效率,此外會啟用造血細胞(如b細胞、巨噬細胞等)的非特異免疫反應,造成實驗的假陽性,所以轉染級質粒的提取純化必須去除內毒素。
4樓:匿名使用者
有的大佬能夠手提質粒並去內毒素,得率也很高,這裡如果沒有太好的技術能力,可以使用kit來代替,我師兄用biog完全達到實驗需求了,和摸索實驗所耗費的時間金錢差不多吧,看個人選擇吧。
提DNA或質粒時,為什麼要用70 的酒精來洗
乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67 左右。因而也可改用9...
為什麼在「粗鹽中難溶性雜質的去除」實
a 如果濾液仍然渾濁,就要檢查原因分析可能情況,例如濾紙是否破損,下面的燒杯是否潔淨等,檢查處理後再過濾,故a操作正確 b 蒸發皿是可以直接受熱的儀器,因此可以放在鐵圈上直接用酒精燈加熱,故b操作正確 c 蒸發過程中要用玻璃棒不斷的攪拌,防止液體受熱不均勻,而導致液滴飛濺,故c正確操作 d 蒸發時,...
如何去除蘿蔔的氣味,蘿蔔為什麼會有特殊的氣味?
我去有意思好吧 把蘿蔔過熱水 熱油,或者榨乾水分之後辣味就揮發。蘿蔔的這種特有的辣味,其實和芥末是相似的,是十字花科的特徵,在生的芥菜和包菜裡面也有。這種刺激的風味也有別樣的吸引力 不然怎麼會有芥末 不喜歡的話,過熱水 熱油,或者榨乾水分之後就揮發啦。這種辣味 於一種異硫氰化物。這種刺激的味兒,本來...