1樓:雲長天雨
乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。 dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67%左右。
因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴)。但是加95%的乙醇使總體積增大,而dna在溶液中有一定程度的溶解,因而dna損失也增大,尤其用多次乙醇沉澱時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵,最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。
也可以用倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。
質粒dna的製備無水乙醇和70%的乙醇有什麼作用
2樓:匿名使用者
你的方法應該不是試劑盒法提取質粒,應該是比較傳統的鹼法提取。
我記得,在除去蛋白質沉澱後,要加入無水乙醇使質粒沉澱,然後離心除去上清,再加入70%乙醇清洗dna沉澱,清洗兩次左右。最後要把dna沉澱溶於te或ddh2o中。
3樓:
在質粒dna的製備中,無水乙醇起到沉澱dna繼而達到濃縮dna的目的,70%的乙醇是用來洗滌dna的,進一步去除雜質。
4樓:匿名使用者
無水乙醇沉澱dna,70%的洗滌dna。
為什麼微生物培養時用75%酒精消毒,植物組織培養時用70%酒精消毒
5樓:匿名使用者
按照做菸草的經驗,用5%~8%次氯酸鈉溶液浸泡5~10分鐘即可。浸泡前先用酒精漂洗消毒,浸泡完成後拿蒸餾水漂洗3~5次。
6樓:匿名使用者
真的是這樣嗎?感覺沒什麼差別吧。
dna的粗提取中酒精的濃度意義和使用需要注意什麼
請問:提取dna時洗滌沉澱為什麼要用70%的乙醇?
7樓:匿名使用者
因為無論用哪種方法提取,沉澱dna時總會加入高濃度的鹽,加鹽的目的是破壞能使蛋白質保持穩定的兩個因素,使蛋白和dna分離並沉澱下來。而此時鹽的陽離子會與dna結合形成dna-陽離子鹽溶於溶液中,再用無水乙醇可以將dna-陽離子鹽沉澱下來,但這樣一來,dna中就含有較多的鹽離子,這勢必會影響下一步實驗的進行,所以要用70%乙醇洗滌dna沉澱(因為在70%乙醇裡dna是不溶的,而鹽離子卻可溶),用無水乙醇則達不到這個目的!ok?
8樓:網友
dna可溶於濃度為70%的乙醇,而細胞中大多數物質不能溶解於其中。
9樓:網友
應該是95%的乙醇溶液。
而且是冷卻的。
因為這樣對dna的凝結效果最好 細胞中其他物質都溶解了。
10樓:酥酥公尺卡卡
是95%的冷酒精。
混合攪拌後,使dna沉澱,濃縮,形成含雜質少的dna絲狀物,懸浮於溶液中。
11樓:長門攜蝴蝶
原因非常簡單:這是溶解dna的最佳濃度!!!
12樓:網友
用95%的乙醇溶解就一切ok了。
濃度要掌握好。
順序不搞錯就對了。
13樓:網友
1.凝結dna
2.可以把dna溶解掉。
這樣做出來的成功率更高。
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