1樓：匿名使用者
用瓊脂糖作支援介質。另外，實驗室常用的核酸染色劑是溴化乙錠（eb）。
要注意觀察凝膠時應根據染料不同使用合適的光源和激發波長，如果激發波長不對，條帶則不易觀察，出現條帶模糊的現象。其好處是染色效果好，操作方便，但是穩定性差，具有毒性。
一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以；如果需要解析度高的電泳，特別是只有幾個bp的差別應該選擇聚丙烯醯胺凝膠電泳；用普通電泳不合適的巨大dna鏈應該使用脈衝凝膠電泳。
擴充套件資料
瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。
但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。
2樓：
主要使用eb進行染色。但是eb劇毒，注意不要直接用手接觸，染色時候應該做好防護。
3樓：匡雅霜
瓊脂糖凝膠電泳的染料有許多種，近幾年較常用的有：
eb-溴乙錠，eb有較大毒性，可致癌，所以使用時一定要萬分小心。eb染色的背景較強。
sybr green--也叫螢光綠如藍，低毒性，但檢測靈敏度沒有eb高。
gelred--號稱無毒，無**滲入型，有傷口就不好說了。背景螢光弱，但加多了容易出現拖帶。由於在市場上**較高，所以有出現很多仿冒貨，買時要擦亮眼睛。
瓊脂糖凝膠電泳操作應注意哪些環節
4樓：駒毅
1. 根據片段大小配製不同濃度的膠（改變解析度），片段越小，需要膠濃度越大。
2. 膠要現制先用。
3. 選擇合適的marker。
4. 配膠的緩衝液與電泳緩衝液要是同一種，且濃度一致（1倍）。
5. 點樣時要加入loading buffer，並注意，不要將樣點到點樣孔之外（飄樣），也不要將膠戳漏（漏樣）。
6. 根據片段大小，及電泳檢測目的，選擇合適的電壓及電泳時間。
7. eb染色。可選擇制膠時加入eb（要在溶玩膠後，且溫度至室溫時（用手握住制膠容器，不燙手即可））；或電泳結束後，將膠放入eb溶液中染色。
瓊脂糖凝膠電泳的原理什麼
5樓：汪小東最懷薰
瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。
但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支援介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支援物電泳最主要區別是：它兼有「分子篩」和「電泳」的雙重作用。
核酸是兩性電解質，其等電點為ph2-2.5，在常規的電泳緩衝液中（ph約8.5），核酸分子帶負電荷，在電場中向正極移動。
核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，具有電荷效應和分子篩效應，但主要為分子篩效應。
線狀雙鏈dna分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與dna分子量對數成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難於在凝膠孔隙中移動，因而遷移得越慢。
電泳緩衝液的組成及其離子強度影響dna的電泳遷移率。在沒有離子存在時（如誤用蒸餾水配製凝膠），電導率最小，dna幾乎不移動；在高離子強度的緩衝液中（如誤加10×電泳緩衝液），則電導很高並明顯產熱，嚴重時會引起凝膠熔化或dna變性。
瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。
蛋白質和核酸會根據ph不同帶有不同電荷，在電場中受力大小不同，因此跑的速度不同，根據這個原理可將其分開。
電泳緩衝液的ph在6~9之間，離子強度0.02~0.05為最適。
常用1%的瓊脂糖作為電泳支援物。瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的dn**段，其解析度雖比聚丙烯醯胺凝膠低，但它製備容易，分離範圍廣。
普通瓊脂糖凝膠分離dna的範圍為0.2-20kb，利用脈衝電泳，可分離高達10^7bp的 dn**段。
dna分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。dna分子在高於等電點的ph溶液中帶負電荷，在電場中向正極移動。
由於糖-磷酸骨架在結構上的重複性質，相同數量的雙鏈dna幾乎具有等量的淨電荷，因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
6樓：小凝聊娛樂
瓊脂糖凝膠電泳的原理：瓊脂糖凝膠電泳是常用的用於分離、鑑定dna、rna分子混合物的方法，這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支援物，利用dna分子在泳動時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。
dna分子在高於其等電點的溶液中帶負電，在電場中向陽極移動。在一定的電場強度下，dna分子的遷移速度取決於分子篩效應，即分子本身的大小和構型是主要的影響因素。dna分子的遷移速度與其相對分子量成反比。
不同構型的dna分子的遷移速度不同。如環形dna分子樣品，其中有三種構型的分子：共價閉合環狀的超螺旋分子（cccdna）、開環分子(ocdna)、和線形dna分子(idna)。
這三種不同構型分子進行電泳時的遷移速度大小順序為:cccdna＞idna＞ocdna
核酸分子是兩性解離分子，ph3.5是鹼基上的氨基解離，而三個磷酸基團中只有乙個磷酸解離，所以分子帶正電，在電場中向負極泳動；而 ph8.0-8.
3時，鹼基幾乎不解離，而磷酸基團解離，所以核酸分子帶負電，在電場中向正極泳動。
不同的核酸分子的電荷密度大致相同，因此對泳動速度影響不大。在中性或鹼性時，單鏈dna與等長的雙鏈dna的泳動率大致相同。
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影響核酸分子泳動率的因素
1、樣品的物理性狀
即分子的大小、電荷數、顆粒形狀和空間構型。一般而言，電荷密度愈大，泳動率越大。但是不同核酸分子的電荷密度大致相同，所以對泳動率的影響不明顯。
對線形分子來說，分子量的常用對數與泳動率成反比，用此標準樣品電泳並測定其泳動率，然後進行dna分子長度（bp）的負對數——泳動距離作標準曲線圖，可以用於測定未知分子的長度大小。
dna分子的空間構型對泳動率的影響很大，比如質粒分子，泳動率的大小順序為：cdna＞idna＞ocdna但是由於瓊脂糖濃度、電場強度、離子強度和溴化乙錠等的影響，會出現相反的情況。
2、支援物介質
核酸電泳通常使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯醯胺凝膠兩種介質，瓊脂糖是一種聚合鏈線性分子。含有不同濃度的瓊脂糖的凝膠構成的分子篩的網孔大小不同，是於分離不同濃度範圍的核酸分子。聚丙烯醯胺凝膠由丙烯醯胺（acr）在n,n,n′-四甲基乙四胺（temed）和過硫酸銨（ap）的催化下聚合形成長鏈，並通過交聯劑n,n′-亞甲雙丙烯醯胺（bis）交叉連線而成，其網孔的大小由acr與bis的相對比例決定。
瓊脂糖凝膠適合分離長度100至60的分子，而聚丙烯醯胺凝膠對於小片段（5bp-500bp）的分離效果最好。選擇不同濃度的凝膠，可以分離不同大小範圍的dna分子。
3、電場強度
電場強度愈大，帶點顆粒的泳動越快。但凝膠的有效分離範圍隨著電壓增大而減小，所以電泳時一般採用低電壓，不超過4v/cm。而對於大片段電泳，甚至用0.
5-1.0v/cm電泳過夜。進行高壓電泳時，只能使用聚丙烯醯胺凝膠。
4、緩衝液離子強度
核酸電泳常採用tae、 tbe、tpe三種緩衝系統，但它們各有利弊。tae**低廉，但緩衝能力低，必須進行兩極緩衝液的迴圈。tpe在進行dna**時，會使dna汙染磷酸鹽，影響後續反應。
所以多採用tbe緩衝液。
在緩衝液中加入edta，可以鰲合二價離子，抑制dnase，保護dna。
緩衝液ph常偏鹼性或中性，此時核酸分子帶負電，向正極移動。
核酸電泳中常用的染色劑是溴化乙錠（ethidium bromide eb）。溴化乙錠是一種扁平分子，可以嵌入核酸雙鏈的配對鹼基之間。在紫外線照射be-dna複合物時，出現不同的效應。
254nm的紫外線照射時，靈敏度最高，但對dna損傷嚴重；360nm紫外線照射時，雖然靈敏度較低，但對dna損傷小，所以適合對dna樣品的觀察和**等操作。300nm紫外線照射的靈敏度較高，且對dna損傷不是很大，所以也比較適用。
使用溴化乙錠對dna樣品進行染色，可以在凝膠中加入終濃度為0.5μg/ml的eb。eb摻入dna分子中，可以在電泳過程中隨時觀察核酸的遷移情況，但是如果要測定核酸分子大小時，不宜使用以上方法，而是應該在電泳結束後，把凝膠浸泡在含0.
5μg/mleb的溶液中10～30min進行染色。be見光分解，應在避光條件下4℃儲存。
7樓：匿名使用者
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支援介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支援物電泳的最主要區別是：它兼有「分子篩」和「電泳」的雙重作用。
瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相當大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。
dna分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。dna分子在高於等電點的ph溶液中帶負電荷，在電場中向正極移動。由於糖-磷酸骨架在結構上的重複性質，相同數量的雙鏈dna幾乎具有等量的淨電荷，因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
瓊脂糖凝膠電泳有哪些優點?
8樓：匿名使用者
（bai 1 ）瓊脂糖凝膠結構均勻，du含水量大（約佔zhi 98 %～ 99 %），近似自dao由電泳，樣內品擴散度較自由電泳小，對樣容品吸收吸附極微，因此電泳圖譜清晰，解析度高，重複性好。
（ 2 ）瓊脂糖呈透明狀，無紫外吸收，電泳後的樣品可直接用紫外檢測；電泳後區帶易染色，樣品易洗脫，便於定量測定。
（ 3 ）操作簡單，電泳速度快，樣品不需事先處理就可進行電泳。
9樓：
生物化學實驗書上有詳細的說明。
瓊脂糖凝膠電泳marker的作用
瓊脂糖凝膠電泳marker的作用是分子標記。dna分子標記具有的優越性有 大多數分子標記為共顯性，對隱性性狀的選擇十分便利 基因組變異極其豐富，分子標記的數量幾乎是無限的 在生物發育的不同階段，不同組織的dna都可用於標記分析 分子標記揭示來自dna的變異 表現為中性，不影響目標性狀的表達，與不良性...
瓊脂糖凝膠電泳具體操作步驟是什麼？需要注意什麼事項
一 操作步驟 1 電泳方法 一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以 如果需要解析度高的電泳，特別是只有幾個bp的差別應該選擇聚丙烯醯胺凝膠電泳 用普通電泳不合適的巨大dna鏈應該使用脈衝凝膠電泳。2 凝膠濃度 對於瓊脂糖凝膠電泳，濃度通常在0.5 2 之間，低濃度的用來進行大片段核酸的電泳，高濃度...
瓊脂糖和瓊脂有什麼不同，瓊脂與卡拉膠有什麼區別 各自有什麼用途 請詳盡解釋說明,重酬
一 熔化溫度不同 1 瓊脂糖 在水中一般加熱到90 以上溶解。2 瓊脂 在水中需加熱至95 時才開始熔化。二 主要原料不同 1 瓊脂糖 於紅藻。2 瓊脂 石花菜，江籬等紅藻。三 包含不同 1 瓊脂糖 瓊脂糖是線性的多聚物，是組成瓊脂的一部分。2 瓊脂 瓊脂是由瓊脂糖和瓊脂果膠組成的。四 應用不同 1...