1樓：匿名使用者
目前常用2種：
1. 螢光染色。很靈敏，但是需要標準品，還要染色
2。 uv。直接測量，方便。但是易受蛋白汙染的影響，敏感度不高。
定磷法測定核酸含量的優缺點是什麼
2樓：多瑰萬俟昊碩
簡單，快速，靈敏度高，但是受蛋白質和核苷酸的影響
核酸含量的測定方法及原理都有哪些
3樓：望歌郗曼雲
核酸定量常用方法及原理如下：
1、光吸收法：核酸中鹼基共軛結構在近紫外光波長260nm處有最大吸收，吸收強度與核酸濃度成正比，因此可以用於核酸定量。
2、定p法：核酸中p含量約為9.5%，因此可以通過測定樣品中的有機p量來進行核酸定量。
核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質之一。
核酸廣泛存在於所有動植物細胞、微生物體內，生物體內的核酸常與蛋白質結合形成核蛋白。不同的核酸，其化學組成、核苷酸排列順序等不同。根據化學組成不同，核酸可分為核糖核酸（簡稱rna）和脫氧核糖核酸（簡稱dna）。
4樓：匿名使用者
核酸定量常用方法如下： ① 光吸收法：核酸中鹼基共軛結構在近紫外光波長260nm處有最大吸收,吸收強度與核酸濃度成正比,因此可以用於核酸定量.
② 定p法：核酸中p含量約為9.5%,因此可以通過測定樣品中的有機p量來進行核酸定量.
測定核酸含量的方法有哪些？
5樓：噠啉
核酸中的有機無機磷酸——→無機磷酸+鉬酸——→磷鉬酸+還原劑（抗壞血酸等）——→鉬蘭
鉬蘭的最大吸收波長在660nm，在一定濃度範圍內，溶液的吸收值與無機磷的含量成正比。該法測得的是總磷量，需減去無機磷的含量才是核酸的含磷量。
（二）定糖法
核酸中的戊糖可在濃鹽酸或濃硫酸作用下脫水生成醛類化合物，醛類化合物可與某些成色劑縮合成有色化合物，可用比色法或分光光度法測定其溶液中的吸收值，在一定濃度範圍內，溶液的吸收值與核酸的含量成正比。
1、核醣的測定
生成的綠色化合物在λ=670nm處有最大的吸收值。
2、脫氧核醣的測定
dna中的脫氧核醣可在濃硫酸作用下脫水生成ω-羥基-γ-酮戊酸，該化合物可與二苯胺生成蘭色化合物，在λ=595nm處有最大吸收值。
（三）紫外吸收法
根據核酸分子中的嘌呤環和嘧啶環在λ=260nm處有最大吸收值，可採用紫外分光光度法測定核酸的含量。
核酸含量的測定方法及原理都有哪些？
6樓：望歌郗曼雲
核酸定量常用方法及原理如下：
1、光吸收法：核酸中鹼基共軛結構在近紫外光波長260nm處有最大吸收，吸收強度與核酸濃度成正比，因此可以用於核酸定量。
2、定p法：核酸中p含量約為9.5%，因此可以通過測定樣品中的有機p量來進行核酸定量。
核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質之一。
核酸廣泛存在於所有動植物細胞、微生物體內，生物體內的核酸常與蛋白質結合形成核蛋白。不同的核酸，其化學組成、核苷酸排列順序等不同。根據化學組成不同，核酸可分為核糖核酸（簡稱rna）和脫氧核糖核酸（簡稱dna）。
常用來測定蛋白質含量的方法有哪些？優缺點是什麼？
7樓：王王王小六
1、凱氏定氮法
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來並為過量的硼酸液吸收，再以標準鹽酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。
由於蛋白質含氮量比較恆定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。
優點：可用於所有食品的蛋白質分析中；操作相對比較簡單；實驗費用較低；結果準確，是一種測定蛋白質的經典方法；用改進方法（微量凱氏定氮法）可測定樣品中微量的蛋白質。
缺點：凱氏定氮法只是乙個氧化還原反應,把低價氮氧化並轉為氨鹽來測定,而不能把**氮還原為氮鹽的形式,所以不可以測出物質中所有價態的氮含量。
2、雙縮脲法
雙縮脲法是乙個用於鑑定蛋白質的分析方法。雙縮脲試劑是乙個鹼性的含銅試液，呈藍色，由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。
當底物中含有肽鍵時（多肽），試液中的銅與多肽配位，配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml。
鑑定反應蛋白質單位1-10mg。
優點：測定速度較快，干擾物質少，不同蛋白質產生的顏色深淺相近。
缺點：①靈敏度差； ② 三羥甲基氨基甲烷、一些氨基酸和edta等會干擾該反應。
3、酚試劑法
取6支試管分別標號，前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，不加標準蛋白溶液，在室溫下放置30分鐘，以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照，於650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。
優點：靈敏度高，對水溶性蛋白質含量的測定很有效。
缺點：①費時，要精確控制操作時間；②酚法試劑的配製比較繁瑣。
4、紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特徵的最大吸收，這是由於蛋白質中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用於測定0.1～0.5mg/ml含量的蛋白質溶液。
取9支試管分別標號，前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液，1號試管不加標準蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，而不加標準蛋白溶液，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致，將液體混合均勻，在280nm波長處進行比色，記錄吸光度值。
優點：簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定後能**。
缺點：①測定蛋白質含量的準確度較差，專一性差； ②干擾物質多，若樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等能吸收紫外光的物質，會出現較大的干擾。
5、考馬斯亮藍法
考馬斯亮藍顯色法的基本原理是根據蛋白質可與考馬斯亮藍g-250 定量結合。當考馬斯亮藍 g-250 與蛋白質結合後，其對可見光的最大吸收峰從 465nm 變為 595nm。
在考馬斯亮藍 g-250 過量且濃度恆定的情況下，當溶液中的蛋白質濃度不同時，就會有不同量的考馬斯亮藍 g-250 從吸收峰為 465nm 的形式轉變成吸收峰為 595nm 的形式，而且這種轉變有一定的數量關係。
一般情況，當溶液中的蛋白質濃度增加時，顯色液在 595nm 處的吸光度基本能保持線性增加，因此可以用考馬斯亮藍 g-250 顯色法來測定溶液中蛋白質的含量。
優點：靈敏度高，測定快速、簡便，干擾物質少，不受酚類、游離氨基酸和緩衝劑、絡合劑的影響，適合大量樣品的測定。
缺點：由於各種蛋白質中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此用於不同蛋白質測定時有較大的偏差。
8樓：其實不然
①凱氏定氮法
原理：蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱，蛋白氮轉化為銨鹽，在強鹼性條件下將氨蒸出，用加有指示劑的硼酸吸收，最後用標準酸滴定硼酸，通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。
②雙縮脲法
原理：尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲，在鹼性溶液中雙縮脲可與cu2+形成穩定的紫紅色絡合物。蛋白質中的肽鍵實際上就是醯胺鍵，故多肽、蛋白質等都有雙縮脲（biuret）反應，產生藍色或紫色複合物。
比色定蛋白質含量。
缺點：靈敏度低，樣品必須可溶，在大量醣類共存和含有脯氨酸的肽中顯色不好。其 精確度 較差 (數mg)，且會受樣品中 硫酸銨 及 tris 的干擾，但 準確度 較高，不受蛋白質的種類影響。
③folin酚法(lowry)
folin酚法是biuret 法的延伸，所用試劑由試劑甲和乙兩部分組成。試劑甲相當於雙縮脲試劑（鹼性銅試劑），試劑乙中含有磷鉬酸和磷鎢酸。
在鹼性條件下，蛋白質中的巰基和酚基等可將cu2+還原成cu+， cu+能定量地與folin－酚試劑反應生成藍色物質，600nm比色測定蛋白質含量。
靈敏度較高(約 0.1 mg)，但較麻煩，也會受 硫酸銨 及 硫醇化合物 的干擾。 步驟中各項試劑的混合，要特別注意均勻澈底，否則會有大誤差。
④紫外法
280nm光吸收法：利用tyr在280nm在吸收進行測定。
280nm-260nm的吸收差法：若樣品液中有少量核酸共存按下式計算：
蛋白質濃度(mg/ml)=1.24e280-0.74e260 （280 260為角標）
⑤色素結合法（bradford 法）
直接測定法：利用蛋白質與色素分子（coomassie brilliant blue g-250）結合物的光吸收用分光光度法進行測定。
考馬斯亮蘭（cbg）染色法測定蛋白質含量。cbg 有點像指示劑，會在不同的酸鹼度下變色；在酸性下是茶色，在中性下為藍色。當 cbg接到蛋白質上去的時候，因為蛋白質會提供 cbg乙個較為中性的環境，因此會變成藍色。
當樣本中的蛋白質越多，吸到蛋白質上的cbg也多，藍色也會增強。因此，藍色的呈色強度，是與樣本中的蛋白質量成正比。
間接測定法：蛋白質與某些酸性或鹼性色素分子結合形成不溶性的鹽沉澱。用分光光度計測定未結合的色素，以每克樣品結合色素的量來表示蛋白質含量的多少。
⑥bca法
bca（bicinchoninc acid procedure，4,4』-二羧-2,2』-二喹啉）法與lowry法相似，主要差別在鹼性溶液中，蛋白質使cu2+轉變cu+後，進一步以bca 取代folin試劑與cu+結合產生深紫色，在波長562 nm有強的吸收。
它的優點在於鹼性溶液中bca 比folin試劑穩定，因此bca與鹼性銅離子溶液結合的呈色反應只需一步驟即完成。靈敏度lowry法相似。
本方法對於陰離子、非離子性及二性離子的清潔劑和尿素較具容忍度，較不受干擾，但會受還原糖 及edta的干擾。
⑦膠體金測定法
膠體金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶膠，呈洋紅色，具有高電子密度，並能與多種生物大分子結合。
膠體金是一種帶負電荷的疏水膠體遇蛋白質轉變為藍色，顏色的改變與蛋白質有定量關係，可用於蛋白質的定量測定。
⑧其他方法
有些蛋白質含有特殊的 非蛋白質基團，如 過氧化物酶含有 亞鐵血紅素基團，可測 403 nm 波長的吸光來定量之。 含特殊金屬的酶 (如鎘)，則可追蹤該金屬。
採用紫外光吸收法測定樣品的核酸含量有何優缺點
9樓：
用紫外光吸收法測定樣品的核酸含量，具有簡單、快速、靈敏度高的優點，並且待測核酸樣品中含有的微量蛋白質和核苷酸等吸收紫外光物質，產生較小測定誤差。 但該法在測定樣品內混雜有大量的上述吸收紫外光物質時，則會產生較大測定誤差，需要設法事先除去。
核酸含量的測定方法有幾種，核酸含量的測定方法及原理都有哪些
惲秀雋鈔欣 核酸中的有機無機磷酸 無機磷酸 鉬酸 磷鉬酸 還原劑 抗壞血酸等 鉬蘭 鉬蘭的最大吸收波長在660nm，在一定濃度範圍內，溶液的吸收值與無機磷的含量成正比。該法測得的是總磷量，需減去無機磷的含量才是核酸的含磷量。二 定糖法 核酸中的戊糖可在濃鹽酸或濃硫酸作用下脫水生成醛類化合物，醛類化合...
皮革甲醛含量的測定方法，皮革甲醛含量的測定方法
用甲醛檢測盒檢測一下就好了，甲醛的釋放是個緩慢的過程，所以要要盡可能的多開窗通風，車裡有皮革坐墊鞋墊還有皮沙發等皮質用品可以用些皮革除甲醛護理液能很快分解掉甲醛，沒有二次汙染。最好在車裡各個角落放一些瑪雅藍除甲醛材料，是利用其奈米級的孔隙來吸附有害氣體。甲醛的檢測方法有哪些 媛你三冬暖 1 ahmt...
敘述生物樣品中蛋白質含量測定方法有哪些
蛋白質含量測定方法有 凱氏定氮法，雙縮脲 biuret 法，酚試劑法 lowry 法，考馬斯亮藍 bradford 法，紫外吸收法，bca法及杜馬斯燃燒法。其中bca法與bradford法成為當今實驗室最為常用的兩種蛋白濃度定量檢測方法。bca法常用現成的試劑盒來做，操作簡單又穩定。以下是厚百上bc...